Mąka kukurydziana. Podkład, przygotowanie i użycie

On Agar z mąki kukurydzianej Jest to solidne pożywki hodowlane, niska siła żywieniowa, przydatna dla subkulturowej Candida albicans. W języku angielskim jest znany jako agar kukurydziany.

Średnia konwencjonalna mączka kukurydziana ma bardzo prostą kompozycję, zawiera mąkę kukurydzianą, agar i wodę. Ze względu na niski poziom odżywczy.

DO. Graficzna reprezentacja kompleksu Candida albicans w agarze mąki kukurydzianej. B. Clamidosporas z kompleksu Candida albicans w mikroskopie, utworzony w mące kukurydzianej. Źródło:. Grahamcolm [CC BY-SA 3.0 (https: // creativeCommons.Org/licencje/by-sa/3.0)]/ B. Przez: CDC/DR. William Kaplan, uprzejmość: Biblioteka obrazu zdrowia publicznego.

Złożone sporulowanie Candida albicans Jest faworyzowany w tym medium, jeśli podczas przygotowywania agaru dodaje się 1% Tween 80. Formacja Clamidospors jest charakterystyczna dla tego gatunku i praktycznie jedyna, która wpływa na człowieka.

Istnieją inne gatunki, które tworzą clamidospor, ale jest mało prawdopodobne, aby wpłynęły one na człowieka, takie jak Candida australis, obecny w odchodach pingwin lub C. Clausenii, który jest rzadko spotykany saprofit. Także, wyjątkowo gatunek C. Stellatoid I C. tropicalis Mogą je utworzyć.

Z drugiej strony dodanie glukozy do średniej mąki kukurydzy sprzyja tworzeniu się pigmentów w szczepach Trichophytom rubrum.

Ważne jest, aby podkreślić, że istnieją grzyby, które nie tworzą strzępek, ani pseudohifas w mąki kukurydzianej, takich jak Cryptococcus neoformans, odróżnienie od innych gatunków.

Można również zastosować agar mąki kukurydzianej w laboratorium lub mediach komercyjnych.

[TOC]

Podstawa

Mąka kukurydziana to podłoże, agar jest środkiem zestalającym, a woda jest rozpuszczalnikiem.

Agar z mąki kukurydzianej można uzupełnić o Tween 80 (poliestr 80 Sorbitita Monoolate lub Polisorbate). Związek ten zmniejsza napięcie powierzchniowe środowiska przez jego moc emulgatora.

Może ci służyć: fosfatydyloinozytol: struktura, trening, funkcje

Tworzy również wrogą atmosferę, która hamuje przesadne mnożenie komórek i stymuluje wzrost strzępek, faworyzując także produkcję clamidosporów; Te ostatnie rozważały struktury oporu. Ta struktura pomaga w identyfikacji gatunku Candida albicans.

Ze swojej strony glukoza w tym medium zwiększa zdolność tworzenia pigmentu niektórych grzybów.

Należy zauważyć, że średnia mączka kukurydziana z glukozą nie służy demonstracji Clamidospor w COmplejo Candida albicans.

Przygotowanie

Domowej mąki kukurydzianej apar

Ważą 47 GR żółtej mąki kukurydzy i rozpuść się w 500 ml wody destylowanej. Ogrzewanie do 60 ° C, podczas gdy przygotowanie jest mieszane w przybliżeniu 1. Następnie przefiltruj kawałek gazy i bawełny, opcjonalnie można go ponownie odfiltrować przez bibułę filtra Whatman nr 2.

Wypełnij objętość przy 1000 ml wodą destylowaną. Dodaj 17 gr woda agaru, ciepło do rozpuszczenia. Autoklawar przez 15 minut w 121 ° C.

Serwować w petriego sterylne. Zapisz w lodówce.

Kolor przygotowanego medium jest białawy z nierównym wyglądem.

Jeśli chcesz przygotować mąkę kukurydzianą z glukozą do przygotowania opisanego powyżej, aby dodać 10 gramo glukozy.

Komercyjny agar mąki kukurydzy

Zważyć 17 grać odwodnioną pożywkę i rozpuść się w 1 litorze wody destylowanej. Mieszaninę można podgrzewać, delikatnie mieszając, aby całkowicie rozpuścić. Sterylizuj w autoklawie w temperaturze 121 ° C, 15 funtów, przez 15 minut.

Wlać sterylne płytki Petri. Niech się zestali. Zainwestuj i oszczędzaj w lodówce do użycia. Temperament przed użyciem.

PH musi wynosić 6,0 ± 0,2 do 25 ºC.

Agar z mąki kukurydzianej z Tween 80

Aby przestrzegać standardu ISO 18416, agar mąki kukurydzianej musi być przygotowany w następujący sposób:

Może ci służyć: koenzym acetyl

Waż 65 gr za litr i dodaj 10 ml Tween 80. Rozgrzewaj się i gotuj przez kilka minut, aż się rozpuści, uważając, aby nie przegrzewać zbytnio. Sterylizuj w 121 ° C przez 15 minut.

Agar z mąki kukurydzianej z glukozą

W celu poprawy mocy chromogennej kolonii Trichophyton Rubrum i odróżnij je od T. Mentagrophytes, Można dodać 0,2% glukozy do oryginalnej formuły. Nie musi mieć animacji 80, ponieważ glukoza hamuje tworzenie się clamidosporów.

Używać

Głównie użycie agarem mąki kukurydzy jest przeznaczone do badania szczepów Candida, pomagając w jego identyfikacji poprzez charakterystyczną obserwację chloidosporów u gatunków albicans. Oznacza to, że użycie tego agaru służy jako pomocnicza metoda identyfikacji tych drożdży.

W tym agaru może rozwinąć zarówno gatunki saprofityczne, jak i patogenne, ale każde tworzą charakterystyczne struktury grzybni. Na przykład gatunki rodzaju Torulopsis nie wytwarza grzybni i rozmnażają się tylko przez blastokonidię.

Podobnie gatunki Trichhosporon i Geotrichum wytwarzają artrokonidię w mąki kukurydzianej, a czasem trudno jest odróżnić jedno i drugie.

Artroconidia Genotrichum wytwarza przedłużenie strzępek przypominających kij hokejowy.

Również produkcja pigmentu z wykorzystaniem agaru mąki kukurydzianej suplementowanej glukozą jest przydatny w identyfikacji Trichophytom rubrum.

Posiany

W mąki z mąki agarowej podejrzane kolonie szczerech. Medium jest wysiewane i inkubowane w 22 ° C przez 24 do 48 godzin. Czas inkubacji można w razie potrzeby przedłużyć.

Demonstracja Clamidospor

W tym celu agar mąki kukurydzianej z Tween 80 musi być zaszczepiony za pomocą techniki Dalmau. Ta metoda polega na przyjmowaniu uchwytu platyny w części podejrzanej kolonii i wykonaniu trzech równoległych cięć w środku, utrzymując uchwyt w temperaturze 45º. Cięcia muszą być oddzielone w odległości 1 cm między jedną a drugą.

Może ci służyć: flora i fauna z Afryki: reprezentatywne gatunki

Następnie umieszczany jest wcześniej płonący obiekt nad zasiewymi rozstępami.

Inkubuj płytki posadzone w 30 ° C przez 48-72 godziny, a następnie zbadaj mikroskop przez pokrywy.

Utrzymanie szczepów grzybiczych

W celu utrzymania szczepów posadzone tablice i powodzie są przechowywane w lodówce (od 4 do 8 ° C). W ten sposób mogą trwać kilka tygodni i być wykorzystywane do celów nauczania lub badań.

QA

W przypadku kontroli sterylności inkubowana jest płyta bez zaszczepienia w temperaturze pokojowej, istnieje, że nie ma wzrostu ani zmiany koloru.

Do kontroli jakości możesz zasnąć znane odmiany, takie jak: Staphylococcus aureus, ATCC 6538, Escherichia coli ATCC 25922, Aspergillus Niger ATCC 16404, Candida albicans ATCC 1023, Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763.

Oczekiwane wyniki są częściowe zahamowanie S. aureus I I. coli. Podczas gdy w pozostałej części szczepów oczekuje się zadowalającego wzrostu.

Aspergillus Niger Rośnie z czarnymi kolonami i sporuje w przybliżonym czasie 5 dni inkubacji.

Candida albicans Kolonie lewarzy z produkcją Clamidospores.

Saccharomyces cerevisiae wytwarzaj duże komórki drożdży.

Ograniczenia

Na dnie płyty powstaje żółty osad, którego nie należy mylić z kolonami.

Bibliografia

1. Neogen Laboratories. Agar z posiłków kukurydzianych. Dostępne na: Foodsafety.Neogen.com.
2. MICROKIT HULTIVATIVE Media. Agar z posiłków kukurydzianych. Dostępne w: Kultura medialna.com.
3. Linares M, Solís F. Przewodnik Identyfikacja drożdży. Dostępne na: http: // www.przewodnik.Ożywę.
4. Urcia F, Guevara M. Obrót silnika. Peru Med.Do potęgi. Zdrowie publiczne, 2002; 19 (4): 206-208. Dostępne na: Scielo.com
5. Dom domowy g. Ogólna mikologia. 1994.  2 edycja. Central University of Wenezuela, Biblioteka. Wenezuela Caracas.
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnoza mikrobiologiczna Bailey & Scott. 12 ed. Pan -american Editorial S.DO. Argentyna.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnoza mikrobiologiczna. Ed. Pan -american Editorial S.DO. Argentyna.
8. Zamek e. Badanie porównawcze niektórych makro i mikroskopijnych metod izolacji i rozpoznawania rodzaju Candida. Obrót silnika. Kolumbijskie farmaceutyczne nauki chemiczne. 1970; 3 (1): 33-57. Dostępne w: Sciences.I.Edu.współ