Agencja siarczka bizmutowego, przygotowanie i zastosowania

On Agar bizmutowy Jest to solidne, selektywne i różnicowe środki kultury, specjalnie sformułowane do izolacji Salmonella enterica subgrupo enterica tajphi seretypo, Wśród innych gatunków salmonelli. Środowisko jest znane jako BSA zgadza się w języku angielskim bizmutowym agarze.

Oryginalna formuła agaru bibmutowego siarczkowego została utworzona w 1927 r. Przez Wilsona i Blaira (podłoże żelaza bizmutowego glukozy); Zawierało to siarczan sodu, glukozę, roztwór bizmutowy, cytrynian amonu, siarczan żelaza i adding agarowy.

48 -HOUT Wzrost inkubacji Salmonella SP w agaru bizmutowym siarczkiem. Źródło: Pixnio.COM Autor: Dr. W. R. Erving, USCDCP

W dzisiejszych czasach istnieje modyfikacja oryginalnego pożywki, złożona z ekstraktu mięsnego, peptones mięsa i kazeiny, wskaźnika bizmutowego siarczanu, glukozy, fosforanu disodum, siarczanu żelaza, jasnozielonych i agar-agar.

Istnieje wiele środków do izolacji gatunków salmonelli, ale jeśli chodzi o odzyskiwanie serotypu typficznego, agar bizmutowy siarczkowy stanowi nad nimi niezwykłą przewagę, ponieważ w większości uzyskano bardzo niski lub zerowy odzysk tego mikroorganizmu.

Konieczne jest jednak zastosowanie więcej niż jednego rodzaju pożywki, jeśli chodzi o izolowanie enteropatogennego, ponieważ agar bizmutowy jest mniej skuteczny dla innych gatunków salmonelli i dla rodzaju Shigella, które są hamowane lub rozwijane bardzo słabo w tym agarie.

Należy zauważyć, że spośród wszystkich gatunków Salmonelli serotyp Typhi jest jednym z najważniejszych enteropatogenów u człowieka, to jest jedyny zbiornik. Ta serowarytość wytwarza gorączkę brzucha, zapalenie żołądka i jelit, bakteriemia i posocznicę.

Z tego powodu istotne jest włączenie tego agaru, gdy analizowane są próbki wody, kału lub żywności, gdzie podejrzewa się Twoja obecność.

[TOC]

Podstawa

Jak większość mediów uprawnych, agar bizmutowy zawiera substancje odżywcze w celu promowania rozwoju bakterii, takich jak peptones i ekstrakt mięsny. Podobnie glukoza działa jako źródło energii i węgla.

Może ci służyć: elementy biogenetyczne

Teraz nie wszystkie bakterie będą rosły w tym pożywce, ponieważ agar bizmutowy jest selektywnym pożywką. Zawiera związki, które hamują wzrost mikroorganizmów dodatnich Grama i niektóre bakterie gramowe. Te związki to: wskaźnik siarków bizmutowych i jasnozielony.

Z drugiej strony fosforan disodum utrzymuje osmolarność i pH pożywki.

Dodatkowo agar bizmutowy jest różnicowym pożywką dzięki obecności siarczanu żelaza, który pokazuje tworzenie H₂S.  H₂S powstały przez bakterie reaguje z siarczanem żelaza i tworzy wyraźnie widoczny nierozpuszczalny osad.

Wreszcie, agar -agar zapewnia solidną spójność środowiska.

Przygotowanie

Waż 52,3 grania odwodnionego pożywki i rozpuszcza się w litrom wody. Ciepło w gotowaniu mieszaniny przez 1 minutę z częstym agitacją, aż do całkowitego rozwiązania. Nie przegrzewaj zbytnio. To medium nie jest sterylizowane w autoklawie, ponieważ ekstremalne ciepło uszkadza pożywkę hodowlaną.

Pozwól ostygnąć w temperaturze 45 ° C i wstrząśnij się przed podaniem na sterylnych płytkach Petriego. Zaleca się tworzenie płyt o dobrej grubości. W tym celu do każdej płyty należy wlać 25 ml. Niech się zestali. Jak jest to środek, który nie jest sterylizowany, jest normalny, aby jego natychmiastowe zastosowanie jest sugerowane.

Jednak badanie przeprowadzone przez D'Aust w 1977 r. Wykazało, że istnieje lepsze odzyskanie Salmonella Typhimurium I Salmonella Enteritidis W miarę starzenia się bibtutu siarczkowy, nie wpływa to na wydajność serowarów Typhi I Parathyphi b.

D'Aous zaleca stosowanie płyt do 4 dnia chłodzenia, chociaż ostrzega, że ​​w miarę starzenia się selektywność zmniejsza Proteus vulgaris.

Dlatego w przypadku bardzo zanieczyszczonych próbek, takich jak kał, preferowane jest użycie nowo przygotowanego medium. W przeciwnym razie do 4 dnia jego przygotowania. Inni autorzy zalecają korzystanie z płyt dzień po ich przygotowaniu, przechowywane w chłodnice.

Może ci służyć: uracyl: struktura, funkcje, właściwości, synteza

Płyty chłodzone powinny być temperamentowe przed użyciem. Średnie pH musi wynosić 7,5 ± 0,2. Kolor niezapłaconego medium jest beżowy i przygotowany jest opalescent Greenish Grey.

Aplikacje

Wśród próbek, które można wysiewać w tym medium, są próbki stolca, wody konsumpcyjne lub żywność i żywność.

Aby ulepszyć izolaty, zaleca się przeprowadzenie leczenia przed wzniesieniem bulionu laktozowego i po wzbogaceniu bulionem tetrationan lub bulionem selenito, przed siewem w agar.

Płytki inkubuje się w 35 ° C ± 0,2 przez 24 do 48 godzin, w aerobiozie.

Charakterystyka kolonii w agaru bizmutowym

Kolonie Salmonella Typhi Zwykle widać je w tym agaru w ciągu 24 godzin z czarnym centrum i otoczone jasnozieloną halo. Podczas gdy za 48 godzin czarna obraca się całkowicie z powodu tworzenia siarczku wodoru.

Salmonella Parathyphi a przedstawia kolonie o zmiennych cechach. Po 18 godzinach inkubacji można zaobserwować czarne, zielone lub przezroczyste kolonie, z wyglądem śluzu. Podczas gdy po 48 godzinach obserwuje się całkowicie czarny, a czasem z wyraźną metaliczną jasnością.

S. Parathyphi a Ma tendencję do rozbicia medium wokół kolonii.

Salmonella sp Ziemia czarna lub szarericolonias, z metalowym jasnym lub bez niego, Maying staje się powierzchnią, czy nie.

Zwykle szczepy coli są całkowicie zahamowane, ale jeśli rosną, rozwijają się jako nieprzezroczyste kolonie zielone lub brązowe i metaliczna jasność. Nie farbuj medium wokół kolonii.

Ograniczenie

-Bardzo słabe inokulum mogą powodować kolonie Salmonella Typhi jasnozielony, niezauważony i zgłaszając kulturę jako negatywne.

Może ci służyć: gałęzie fizjologii

- Agar bizmutowy siarki może hamować odzyskiwanie niektórych gatunków salmonelli, takich jak S. Sendai, s. Berta, s. Gallinarum, s. Abortus-Equi.

-To medium hamuje większość gatunków rodzaju Shigella.

- S. Typhi i s. Arizonae Mogą dać bardzo podobne kolonie.

-Colifliform wyprodukowane przez H₂Takie jak Proteus i Citrobacter wytwarzają kolonie podobne do Salmonella, więc konieczne jest przeprowadzenie biochemicznych testów identyfikacyjnych.

-Należy zrobić dobrą estrię, aby uzyskać izolowane kolonie; Jest to jedyny sposób na obserwowanie typowych cech kolonii rodzaju Salmonella.

QA

W celu kontroli sterylności płytki jest inkubowana bez zaszczepienia w 37 ° C, oczekuje się, że nie ma zmiany ani zmiany koloru.

Do kontroli jakości możesz zasnąć znane odmiany, takie jak:

Escherichia coli ATCC 25922, Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Salmonella Typhi ATCC 19430, Shigella Flexneri ATCC 12022, Enterococcus faecalis ATCC 29212.

Oczekuje się, że Escherichia coli I Shigella Flexneri są częściowo zahamowane odpowiednio rozwój kolonii zielonkawych i brązowych brązowych. Podczas gdy oba salmonglars muszą mieć doskonały rozwój z czarnymi kolonami o metalicznej jasności, a wreszcie Enterococcus faecalis Musi być całkowicie zahamowany.

Bibliografia

1. Wilson, w., & E. M. MCV. Blair. Zastosowanie pożywki żelaza bizmutowego glukozy do izolacji B. Typhosus I B. Odmieniec. The Journal of Higiene, 1927; 26(4), 374-391. Odzyskane z .Jstor.org
2. D'Aust Jy. Wpływ warunków przechowywania wydajności agaru bizmutowego. J Clin Microbiol. 1977; 5 (2): 122-124. Dostępne w: NCBI.NLM.Nih.Gov
3. IVD Laboratories. Agar bizmut-siarczan według Wilsona-Blaira. 2009. Dostępne na: Bismuthsulfitagar_span_jan_2009%20 (2).PDF
4. Himedia Laboratories. Agar bizmutowy. 2017. Dostępne na: Himediabs.com
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnoza mikrobiologiczna Bailey & Scott. 12 ed. Pan -american Editorial S.DO. Argentyna.
6.  Morales R, z La Cruz D, Leyva G i Ybarra M. Bakteriologiczna jakość surowego koziego mleka wytwarzanego w Miravalles, puebla. Rev mex z ing chem 2012; 11 (1): 45-54