Chromatogram

Typowy chromatogram. Źródło: Heliagon, Wikimedia Commons

Co to jest chromatogram?

On chromatogram Jest to dwuwymiarowy rekord graficzny uzyskany w pożywce chłonnej, która pokazuje oddzielenie substancji poprzez chromatografię. W chromatogramie powstaje widoczny wzór, piki lub plamy, które odzwierciedlają fizyczne oddzielenie składników mieszanki.

Górna figura jest chromatogramem z trzema pikami, A, B i C, trzema składnikami próbki oddzielonej chromatografią. Obserwuje się, że każdy z trzech pików ma inną wysokość i lokalizację na osi czasowej chromatogramu.

Oś zarządzenia lub i, rejestruje informacje o intensywności sygnału (w MV Milivolts w tym przypadku). Reprezentuje zapis, w zależności od detektora, jakiejś właściwości fizycznej substancji lub składnika oddzielnie od mieszanki.

Wysokość piku jest proporcjonalna do stężenia oddzielnego składnika próbki w optymalnym układzie. Zatem na przykład łatwo jest wizualizować, że komponent B jest w większej proporcji niż A i C.

W odciętej lub osi x reprezentowany jest czas retencji składników próbki lub mieszaniny. Jest to czas, który przechodzi z wstrzyknięcia próbki, aż się zatrzyma, będąc różnym dla każdej czystej substancji.

Czego jest chromatogram?

Stanowi ostateczny zapis całego procesu chromatografii. Od niego otrzymują parametry zainteresowania analitycznego. Można to uzyskać jako plik elektroniczny, wydrukowany histogram lub w obsłudze procesu (na przykład na papierze).

Oś y jest generowana przez detektory sygnałów lub intensywność odpowiedzi, jako spektrofotometry. Optymalna analiza czasu, cechy uzyskanych pików lub plam, rozmiar, lokalizacja, kolor, między innymi są niezbędne.

Może ci służyć: wiązanie chemiczne

Analiza chromatogramów ogólnie wymaga zastosowania kontroli lub standardów, substancji tożsamości i znanego stężenia. Analiza tych kontroli pozwala na ustalenie w porównaniu z charakterystycznymi próbkami składników badanej próbki.

W chromatogramie można wykonać obserwację i analizę sposobu oddzielenia składników mieszaniny. Jego optymalne badanie pozwala zidentyfikować substancję, pokazać jej czystość, kwantyfikować ilość substancji obecnych w mieszance, między innymi.

Wyodrębnione informacje mogą być jakościowe. Na przykład, gdy substancje są zidentyfikowane i określono ich czystość. Informacje ilościowe są związane z określeniem liczby składników mieszaniny i stężeniem oddzielnego analitu.

Identyfikacja substancji

Analizując wyniki chromatogramu, różne substancje można zidentyfikować poprzez porównanie czasów retencji z czasami znanych substancji. Można zauważyć, czy badane substancje przemieszczają się w tej samej odległości, jeśli mają one w tym samym czasie co znane substancje.

Na przykład chromatogram pozwala wykryć i identyfikować w moczu sportowców, metabolity leków, takie jak stymulanty i sterydy. Jest to ważne wsparcie w badaniu i badania niektórych metabolitów wytwarzanych przez zaburzenia genetyczne u noworodka.

Chromatogram ułatwia wykrywanie halogenowanych węglowodorów obecnych w wodzie pitnej, między innymi. Jest niezbędny w analizie laboratoryjnej kontroli jakości, ponieważ pozwala wykryć i zidentyfikować zanieczyszczenia obecne w różnych produktach.

Klasyfikacja czystości substancji

W chromatogramie można rozróżnić substancje czyste i nieczyste. Czysta substancja wytwarzałaby pojedynczy pik w chromatogramie, podczas gdy substancja nieczysta wytworzyłaby dwa lub więcej pików.

Może ci służyć: reakcja neutralizacji

Właściwie dostosowując warunki, w których wykonywana jest chromatografia, można uniknąć dwóch substancji.

Kwantyfikacja substancji

Przez analizę analizy pików chromatogramu można obliczyć stężenie składników próbki.

Dlatego obszar dzioba jest proporcjonalny do ilości substancji obecnej w próbce. Te dane ilościowe są uzyskiwane w systemach o wysokiej czułości, takich jak te generowane na przykład przez chromatografie gazów lub cieczy.

Chłopaki

Jedna z klasyfikacji chromatogramów jest ściśle powiązana z różnymi typami chromatografii, które generują odpowiedni chromatogram.

W zależności od warunków wykonywania detektory, między innymi, chromatogram będzie się różnić pod względem zawartości i jakości.

Chromatogramy na papierze lub cienkiej warstwie

Chromatogram można generować bezpośrednio na papierze lub cienkiej warstwie, bezpośrednio pokazując rozkład lub rozkład składników próbki.

Jest to bardzo przydatne do separacji i badania kolorowych substancji, które mają naturalne pigmenty, takie jak chlorofilu. Może podlegać procesom rozwoju w przypadku, gdy substancje nie mają naturalnego koloru i jest przydatny do badań jakościowych.

Chromatogramy generowane przez detektory

Chromatogram można również uzyskać za pomocą detektora, który rejestruje odpowiedź, wyjście lub końcowy sygnał chromatografii. Jak wspomniano wcześniej, detektor ten jest zwykle spektrofotometr, spektrometr masowy, automatyczne, elektrochemiczne sekwencery,.

Chromatogramy generowane w kolumnach, w gazach lub cieczach, a także o wysokiej rozdzielczości w cienkiej warstwie, używają detektorów.

W zależności od rodzaju detektora chromatogram można zaklasyfikować jako różnicowy lub całka, w zależności od postaci odpowiedzi detektora.

Może ci służyć: neutralny atom

Chromatogram różnicowy

Detektor różnicowy w sposób ciągły mierzy sygnał odpowiedzi chromatogramu, podczas gdy kompleksowe detektory gromadzą odpowiedni sygnał.

Chromatogram różnicowy jest chromatogramem uzyskanym przez detektor różnicowy. Wśród tych detektorów można wymienić na przykład spektrofotometry i zmiany detektory w przewodności elektrycznej.

Ten typ chromatogramu wykazał wynik oddzielenia anionów od próbki, wykryty za pomocą fotometrii pośredniej. Te same wyniki uzyskano również dla badania jonów, na przykład z końcowym wykrywaniem przez zachowanie.

Chromatogram różnicowy. Źródło: Pixabay

Górny wykres pokazuje przykład różnicowego chromatogramu, uzyskanego przez automatyczne sekwencery DNA (kwas deoksyrybonukleinowy). Wykres wyraźnie pokazuje cztery kolory, jeden kolor dla każdej z azotowych podstaw DNA.

Dzięki obsłudze programu skomputeryzowanego interpretacja sekwencji analiz DNA jest ułatwiona, a także bardziej złożonych analitów.

Integralny chromatogram

Integralny chromatogram odpowiada tym uzyskanym przez detektor całkowy. Ten chromatogram pokazuje wyjście jednego badanego składnika. Nie uzyskuje się kilku pików, jak w różnicy.

W integralnym chromatogramie rekord otrzymuje się z formularzem opisanym jako krok. Ta forma jest częścią chromatogramu, który odpowiada ilości pojedynczej substancji, która wychodzi z kolumny.

Bibliografia

1. Bhanot, zm. Jak odczytać chromatogram? Trening laboratoryjny odzyskano.com.
2. Co to jest chromatogram? Źródło: ChromatographyToday.com.
3. Mathias, J. Przewodnik dla początkujących: Jak interpretować chromatografię gazową Chromatografia Spektrometria masowa. Pobrano z Innovatechlabs.com.
4. Chromatogram. Pobrano z Secyty.Jest.
5. Chromatografia papierowa. Odzyskane z.Wikipedia.org.