Bulion z Lactosado

Budowniki mleczne mętnie. Źródło: Zdjęcie wykonane przez autora MSC. Marielsa Gil

Co to jest bulion z Lactosado?

On Bulion z Lactosado Jest to hodowla płynna, nie selektywna, stosowana głównie jako środek wstępnej wzniesienia w izolacji szczepów Salmonella, Od analizy mikrobiologicznej po przetworzonej żywności, produktów mlecznych lub wody. Jest to zalecane przez Międzynarodową Komisję Specyfikacji Mikrobiologicznych dla żywności (ICMPF).

Pożyód zawiera enzymatyczną żelatynę, ekstrakt z mięsa i laktozy, substancje niezbędne do wzrostu bakteryjnego. Ponadto laktoza jest fermentacyjnym węglowodanem, dlatego niektóre coli są w stanie rozwinąć go przy produkcji gazu.

Dlatego bulion z Lactosado jest zalecany przez American Public Health Association (APHA) do domniemanego badania bakterii coli i kału bakterii coli. Jest opisany jako doskonała alternatywa zastąpienia bulionu triptose Lauril Sulfate w standardowej technice najbardziej prawdopodobnej liczby (NMP), stosowanej do analizy mikrobiologicznej próbek żywności, wód mlecznych i powierzchniowych, podziemnych, rekreacyjnych, domowych i przemysłowych resztek.

Podstawa

W analizie mikrobiologicznej niektórych próbek przejście wstępnej wzniesienia jest niezbędne do odzyskania określonego mikroorganizmu, który może znajdować się w bardzo niskiej ilości lub w warunkach niezawodnych, które naruszają lub minimalizują jego żywotność. 

Tak jest w przypadku suchej i przetworzonej żywności, prawdopodobnie zanieczyszczonej Salmonellas sp. W takich przypadkach, jeśli bakterie są obecne, doznały nadużycia fizycznego i chemicznego podczas procesu produkcji produktu.

W taki sposób, że mikroorganizmy są narażone na czynniki niepożądane, takie jak odwodnienie, narażenie na produkty hamujące lub toksyczne oraz nakładanie się generowane przez obecność innych bakterii w większej ilości, między innymi.

W tym sensie bulion z Lactosado ma efekt naprawy uszkodzonych struktur mikroorganizmu, powodując, że odzyskuje się i rozmnażał, w taki sposób, że można go wykryć.

Podobnie bulion z laktosado ma zdolność rozcieńczania substancji hamujących, które mogą wpływać na jego żywotność, umożliwiając jego rozwój. Ponadto skład żywieniowy bulionu mlekowego jest strategiczny, aby sprzyjać rozwojowi Salmonella sp powyżej innych mikroorganizmów.

Może ci służyć: paleobiologia: historia, specjalności, odkrycia

Aby uzyskać ostateczną identyfikację, musi to być subkulturowe wobec innych ostatecznych kultur.

Z drugiej strony skład pożywki pozwala również wykryć mikroorganizmy fermentarne laktozy, które wytwarzają gaz.

Przygotowanie

Aby przygotować litr bulionu laktozy, 13 gramów odwodnionego pożywki należy zważyć i rozpuścić w 1.000 ml wody destylowanej.

Aby pomóc w rozwiązaniu pożywki w wodzie, możesz trochę podgrzać roztwór, ale nie za dużo.

Po jednorodne, roztwór jest przygotowywane w następujący sposób: Jeśli bulion zostanie użyty do wyszukiwania coli, przygotowano wstrząs z rurkami testowymi, który wprowadza rurkę fermentacyjną Durham.

Rurka Durhama jest bardzo ważnym szczegółem, ponieważ pozwoli na tworzenie się gazu, danych o dużej wartości w poszukiwaniu coli.

Przygotowane rurki, 10 ml bulionu Lactosado jest wydawane w nich, ilość, która musi być wystarczająca do pokrycia całej rurki Durham.

Jeśli bulion z laktosado będzie stosowany jako bulion przed enrique, nie jest konieczne umieszczenie rurki fermentacyjnej Durham. W takim przypadku wymagane jest więcej średniej (225 ml), które będzie serwowane w 500 ml słoikach, szerokie usta i z oporną na termiczną osłonę niciową.

Następnie rurki lub butelki są pobierane do autoklawów w 121 ° C przez 15 minut.

Medium musi znajdować się na końcowym pH 6.9 ± 0.2 do 25 ° C.

Bulionie są przechowywane w lodówce do czasu użycia. Przed użyciem muszą one temperować w temperaturze pokojowej.

Z drugiej strony bulion z Lactosado można również przygotować w podwójnym stężeniu.

Może ci służyć: herpetologia: historia, kolekcje, funkcja herpetologa

Niektóre laboratoria dodają Brome. W takim przypadku bulion ma fioletowy kolor, a jeśli fermentacja zmienia się na żółty.

Aplikacje

W laboratoriach mikrobiologii bulion z Lactosado jest szeroko stosowany, ponieważ jest to stosunkowo ekonomiczne medium, które oferuje niezawodne i szybkie wyniki (24-48 godzin).

Może być stosowany do analizy całkowitej i kału w wodzie i żywności lub jako bulion przed enrique Salmonella.

Wstępne wzburzenie

Wstępne wzburzenie jest krokiem przed wzbogaceniem próbki, co znacznie poprawia odzyskiwanie bakterii płciowych Salmonella W przetworzonej żywności.

Aby to zrobić, próbka pokarmu stałego (25 gramów) lub cieczy (25 ml) jest wysiewana w 225 ml bulionu Lactosado, inkubując przez 24 do 48 godzin. Następnie będzie subkulturowy w medium wzbogaconym jako bulion selenito cistina lub bulion tetrationato. Następnie przejdź do selektywnych mediów XLD i SS.

Całkowita analiza coli i kału

Jest to doskonałe medium jako wskaźnik zanieczyszczenia kału.

Dlatego bulion z Lactosado jest idealny do przypuszczalnej fazy badania coli, metodą najbardziej prawdopodobną liczbą.

W przypadku próbek, w których podejrzewa się duża liczba coli, zaszczepiona zostanie mniejsza ilość tego samego (1 ml), podczas gdy w przypadku próbek, w których podejrzewane są mniej bliliform, zaszczepiona jest większa objętość próbkowania (10 ml).

Do analizy powstaje 10^-1, 10^-2, 10^-3, tworząc akumulator 3-5 dla każdego użytego stężenia.

Z każdego rozcieńczenia ta sama objętość jest zasiana do bulionów Lactosado.

Rurki inkubowane są przez 24 godziny. Buliony, które są ujemne, są inkubowane przez 24 godziny.

Może ci służyć: fauna i flora morza peruwiańskiego

Interpretacja wyników jest wykonywana przez obserwację dwóch cech: pierwsza to obecność lub brak zmętnienia, a ponieważ to medium nie zawiera wskaźnika pH, nie będzie zmiany koloru.

Drugi to produkcja gazu. Gaz można łatwo udowodnić w rurce Durham, przez pojawienie się jednego lub kilku pęcherzyków powietrza w środku.

Uważa się to za pozytywne, jeśli zaobserwowane są obie cechy, to znaczy zmętnienie z produkcją gazu. Pozytywne rurki muszą zostać odrzucone w pożywce potwierdzającej (2% jasnej zielonej rosół i bulion EC).

Średnia kontrola jakości

• W przygotowaniu medium ważne jest, aby nie zapomnieć o umieszczeniu rur Durhams, jeśli celem tego samego jest badanie coliforms.
• Nie przegrzewaj medium przed sterylizacją.
• Rozmowuj w rurach testowych przed sterylizacją, nigdy później.
• Nie używaj, jeśli medium jest przygotowane dłużej niż 3 miesiące.
• Nie używaj, jeśli zaobserwowano jakąkolwiek zmianę zwykłych charakterystyk medium.
• Przygotowując partię bulionu Lactosado, musisz udowodnić jakość tych samych szczepów siewowych znanych jako Escherichia coli, Enterobacter Aerogenes, Citrobacter freundii I Klebsiella pneumoniae. Rosną bardzo dobrze, z produkcją gazu (kontrola pozytywna).
• Może również obejmować Pseudomonas aeruginosa, Salmonella Typhimurium albo Enterococcus faecalis, Rosną dobrze, ale bez produkcji gazu (kontrola negatywna).
• Musi być w toku, że oryginalny kolor odwodnionego pożywki jest beżowy, a kolor bardzo wyraźnego i przezroczystego żółtego pożywki. Jeśli zaobserwowana jest zmiana koloru lub wyglądu, może wystąpić pogorszenie tego samego.

Bibliografia

1. Acevedo r., Severiche, c., Castillo, m. Biologia środowiska i mikrobiologia. University of Cartagena, Kolumbia.
2. CDADA PREMADISA LABOROTIONS. Podwójne stężenie bulionu laktozy (europejski pharm).