Izolacja technicznych mikroorganizmów i znaczenia

On Izolacja mikroorganizmów Implikuje zestaw technik stosowanych do wydobywania i oddzielenia gatunków interesujących drobnoustrojów od ich naturalnego siedliska na siedlisko In vitro. Techniki te są zestawem wielu podstawowych i niezbędnych narzędzi do badań mikrobiologicznych.

Większość znanych mikroorganizmów i które zostały zdefiniowane przez naukę, to te, które mogły być izolowane i utrzymywane w pojemnikach, które częściowo, w wewnętrznych warunkach, w których żyją.

Typowy obraz kolonii mikroorganizmu bakteryjnego izolowane w solidnym pożywce wewnątrz kapsułki Petriego (obraz Nadya_IL w WWW.Pixabay.com)

Być może jednym z pierwszych mężczyzn, którzy ćwiczą izolację mikroorganizmów, był Anton Van Leeuwenhoek (1632-1723), który zebrał i izolował próbki drobnoustrojów z dużej liczby miejsc i ekosystemów, aby uważnie je obserwować pod setkami mikroskopów, które zaprojektował.

Jednak dopiero w czasach naukowców Louis Pasteur i Robert Koch, w ciągu dziewiętnastego wieku, który zaczął wykonywać rygorystyczne praktyki, które służyły do ​​izolacji określonych mikroorganizmów, a wszystko to, aby szczegółowo zbadać ich szczegółowo szczegółowo.

W przeciwieństwie do Leeuwenhoek, badacze ci skupili się na izolowaniu zdefiniowanych gatunków innych gatunków mikrobów środowiskowych. Ponadto byli zainteresowani utrzymaniem ich przy życiu tak długo, jak to możliwe poza środowiskiem naturalnym.

Obecnie opracowano precyzyjne techniki izolacji i wzrostu wielu różnych mikroorganizmów uzyskanych z prawie każdego środowiska na biosferze.

[TOC]

Techniki izolacji mikroorganizmu

Wszystkie izolaty mikroorganizmów zaczynają się od zbioru próbki w naturze, w której znaleziono mikroorganizmy zainteresowania. Miejsca te mogą być zranione w tkankach zwierzęcych lub warzywnych, glebach lub podłożach, kałużach, morzach, powierzchniach takich jak skóra itp.

Próbka jest wytwarzana przez dotykanie lub wspieranie pojemnika, który ma medium z wymaganiami odpowiednimi do wzrostu mikroorganizmów na powierzchni których są pożądane. W tym pojemniku otrzymasz tak zwaną „uprawę” drobnoustrojów.

Może ci służyć: stentor

Ogólnie rzecz biorąc, pierwsza uprawa uzyskana z naturalnych siedlisk jest niewątpliwie „kultura mieszana”, to znaczy składa się z dużej liczby różnych gatunków drobnoustrojów.

Jednak większość gatunków mikroorganizmu może być odizolowana od siebie w laboratorium, starając się uzyskać kultury mikroorganizmu, w których rosną tylko gatunki zainteresowania lub, innymi słowy, rośnie „czyste uprawy”.

Zasadniczo proces przeprowadzany w celu uzyskania „czystych upraw” jest tak zwany „izolacja mikroorganizmów”.

Istnieje wiele technik izolacji mikroorganizmów, a w szczególności niektóre specyficzne dla pewnego rodzaju mikroorganizmu. W innych przypadkach możliwe jest uzyskanie czystej uprawy zebrania tylko próbki środowiska naturalnego.

Wśród najczęściej stosowanych technik izolacji w celu oddzielenia zainteresowania występującego w mediach hodowli mieszanej są:

Zarysowania lub paski

Być może jest to najczęściej stosowana metoda izolacji mikroorganizmów. Ta technika polega na przygotowaniu sterylnego solidnego pożywki ze wszystkimi związkami odżywczymi niezbędnymi do wzrostu mikroorganizmu w szklanym pojemniku, takim jak kapsułka Petriego.

Używając drobnego instrumentu, zwykle wskazywanego, dotyczy go mikroorganizmu, który jest pożądany płyt.

Odbywa się to intensywnie w przód iw tył przez powierzchnię stałego lub uzgodnionego medium, jakby to był zygzak. Zwykle odbywa się to, aż przykryto mniej więcej jedną trzecią średnicy agaru na płycie.

Fuzja z medium lub podszewką

W przypadku tej metody przeprowadza się rozcieńczenie środowiska, gdy drobnoustroje zebrane do tego stopnia, że ​​tylko kilkaset komórek jest dla każdego mililitera pożywki, w której rozcieńczono je.

Może ci służyć: aspergillus fumigatus

Z tego rozcieńczenia pobierane są i mieszane z medium, które zostanie dodane w pojemniku, zanim go zestrzela. Jako mieszanka między pożywką uzgodnioną a płynnym pożywką, w której mikroorganizmy są zanurzone w środku i są widoczne tylko, dopóki nie rozprzestrzeni się w postaci kolonii.

Rozwijając się jako kolonia, łatwiej jest je oddzielić od reszty mikroorganizmów innymi metodami, takimi jak zarysowanie, na przykład.

Rozcieńczenia seryjne

Ta metoda polega na wykonywaniu rozcieńczeń seryjnych z medium, w którym znajdują się mikroorganizmy. Przykładem tego są rozcieńczenia, które są tworzone do oczyszczania Lactococcus lactis albo Lactobacillus acidophilus, Bakterie odpowiedzialne za produkcję sera i jogurtu.

Około 1 mililitera rurki zawierającej kwaśne mleko lub wcześniej sfermentowany jogurt i ten mililitr jest zaszczepiony sterylnym mlekiem bez mikroorganizmów. Następnie pobrane jest około mililiter wspomnianego mleka, a proces powtarza się.

Powtarza się to około trzech lub czterech kolejnych czasów, co jest bardzo prawdopodobne Lactococcus lactis albo Lactobacillus acidophilus w izolowanym pożywce zanieczyszczeń, które mogą reprezentować inne drobnoustroje.

Szczegółowa fotografia tego miejsca i typowych materiałów dla izolowanych mikroorganizmów (obraz Sintija valucka na www.Pixabay.com)

Procedura wzbogacania

Metodologię tę osiąga się w ramach rosnących mikroorganizmów w pożywkach hodowlanych z warunkami, które stymulują lub ułatwiają wzrost interesujących gatunków, aw wielu przypadkach w warunkach hamujących wzrost innych zanieczyszczających mikroorganizmów.

Bakterie tego gatunku Salmonella Rosną w mediach hodowlanych z selenito, ponieważ te mikroorganizmy przekształcają selenit w selen, aby móc go metabolizować. Selenito w środku utrudnia przyswajanie składników odżywczych w przypadku innych mikroorganizmów różnych od salmonellas.

Jedno lub ekskluzywna technika

Być może jest to najtrudniejsza i mniej skuteczna technika izolacji drobnoustrojów. Oznacza to umieszczenie kropli pożywki (próbki), w której mikroorganizmy znajdują się w sterylnej osłonie, a następnie umieszczane na płycie mikroskopowej.

Może ci służyć: auksotrof

Następnie, gdy jest obserwowany, pojedyncza komórka jest ekstrahowana za pomocą sterylnej mikro pipety. Spadek umieszcza się w innych sterylnych osłonach, które są inkubowane w odpowiedniej temperaturze dla mikroorganizmu. Na koniec obserwuje się ponownie pod mikroskopem, aby pokazać wzrost.

Jeśli, gdy nowe komórki powstają ponownie z poszczególnych komórek, które zostały pobrane, są one dodawane w sterylnej pożywce hodowlanej, aby uzyskać w pełni izolowaną czystą uprawę.

Spersonalizowane techniki

Istnieją niekończące się różne drobnoustroje na planecie Ziemia, które są rozproszone przez prawie wszystkie znane ekosystemy. Niektóre mikroorganizmy są znane jako ekstremofile i potrzebują wyłącznych warunków dla ich rozwoju i wzrostu.

Te ekstremalne warunki są zarówno korzystne, jak i niekorzystne do izolacji, ponieważ chociaż pozwalają tylko na rozwój tych mikroorganizmów, mogą być trudne do odtworzenia In vitro.

Znaczenie

Izolacja mikroorganizmów reprezentowała jeden z najważniejszych postępów w dziedzinie nauki i medycyny. Umożliwiło to ludzkości studiowanie i opracowanie skutecznych metod leczenia różnych patogenów drobnoustrojów.

Obecnie wiadomo na pewno, że mikroorganizmy stanowią istotną część wszystkich ekosystemów, więc uzyskanie izolacji niektórych z nich o względnym znaczeniu dla człowieka pozwala badaczom na intensywne badanie ich, aby szczegółowo zrozumieć jego funkcję w każdym ekosystemie.

Bibliografia

1. Kruif, P. (1996). Łowcy drobnoustrojów. Houchton Mifflin Harcourt.
2. López, m. J., Nichols, n. N., Dien, ur. S., Moreno, J., I oba, r. J. (2004). Izolacja mikroorganizmów do biologicznej detoksykacji lignocelulozowych hydrolizatów. Mikrobiologia stosowana i biotechnologia, 64(1), 125-131.
3. SPIGNO, g., Tramelli, L., Galli, r., Pagella, c., & De faveri, D. M. (2005). Biofiltracja oparów dichlorometanu: izolacja mikroorganizmów.
4. Tresner, godz. D., & Hayes, J. DO. (1970). Ulepszona metodologia izolowania mikroorganizmów gleby. Appl. Środowisko. Mikrobiol., 19(1), 186-187.
5. Willey, J. M., Sherwood, L., & Wouretton, c. J. (2009). Zasady mikrobiologii Prescott. Boston (MA): McGraw-Hill Higher Education.