Vogel-Johnson Agar What Is, Foundation, przygotowanie, używa

On Vogel-Johnson Agar Jest to solidne, selektywne i różnicowe środki kultury, specjalnie sformułowane do izolacji Staphylococcus aureus. To medium zostało stworzone przez Vogela i Johnsona w 1960 roku z modyfikacji agaru Telurito Glycina sformułowanego w 1955 r. Przez Zebovitz, Evans i Niven.

Modyfikacja polegała na zwiększeniu stężenia manitolu obecnego w środowisku i włączeniu wskaźnika pH. Obecna formuła składa się z tripteíny, ekstraktu drożdżowego, mannitolu, fosforanu dipotasowego, chlorku litu, glicyny, czerwieni fenolowej, agaru, 1% roztworu telurytu potasu.

Należy zauważyć, że istnieją inne media, które, podobnie jak agar Vogel-Johnson, są selektywne do izolacji S. aureus, takie jak słony agar Mannitolu i Agar Baird Parker. W tym sensie można powiedzieć, że fundament Vogel - Johnson zgadza się.

W pierwszej kolonie S. aureus Wyróżniają się fermentolem. Z drugiej strony, w drugiej S. aureus Charakteryzuje się zmniejszeniem teluro do teluro i tworzenia szarych kolonii na czarne. Obie właściwości są obserwowane w agaru Vogel-Johnson.

To medium, podobnie jak jego odpowiedniki, jest przydatne do wykrywania Staphylococcus aureus W próbkach żywności, kontroli zdrowia produktów przemysłowych i w próbkach klinicznych.

Podstawa

Wkład składników odżywczych

Medium Vogel - Johnson zawiera ekstrakt z triptein i drożdżak; Obie substancje dostarczają aminokwasów długiego łańcucha, które służą jako źródła węgla i azotu niezbędne do wzrostu bakteryjnego. Bakterie zdolne do wzrostu w tym pożywce będą przyjmować składniki odżywcze tych substancji.

Moc selektywna

Vogel - Johnson Agar jest w stanie hamować wzrost bakterii ujemnych Grama, a nawet niektóre pozytywne gramy, sprzyjające rozwojowi pozytywnych gronkowców koagulazy. Substancje inhibitora to telluryt potasu, chlorek litowy i glicyna.

Moc różnicowa

Substancjami, które tworzą to różnicowe pożywkę to mannitolu i telluryty potasu. Manitol jest węglowodanem, a gdy wytwarzane są fermentowane kwasy, które wytwarzają pożywkę od czerwonego do żółtego, co dzieje się dzięki obecności wskaźnika pH czerwonego.

Podczas gdy bezbarwny teluryt, gdy jest redukowany do metalicznego teluro, ma ciemnoszary kolor.

On Staphylococcus aureus fermentuje mannitol i redukuje teluro do teluro. Dlatego typowe kolonie S. aureus W tym medium są szare lub czarne otoczone żółtym medium.

Bakterie, które rosną w tym pożywce i nie zmniejszają telurytu ani nie fermentują mannitolu, będą tworzyć przez przezroczyste kolonie otoczone czerwoną pożywką, jeszcze bardziej intensywne niż oryginalny kolor, ze względu.

Z drugiej strony bakterie, które redukują teluryt, ale nie fermentują manitol, będą rosły, gdy szare lub czarne kolonie otoczone intensywnym czerwonym medium.

Jeśli medium przygotowane bez dodania tellurite potasu, kolonie S. aureus Rozwijałyby się jako żółte kolonie, otoczone żółtym medium, jak to ma miejsce w słonym mannitolu agaru.

Bilans osmotyczny i środek zestalania

Fosforan dipotasowy utrzymuje bilans osmotyczny pożywki i dostosowuje pH do neutralności 7.2. Podczas gdy agar nadaje solidną spójność medium hodowlanemu.

Przygotowanie

1% P/V Roztwór telurytu potasu

To rozwiązanie nie jest uwzględnione w środowisku odwodnionym, ponieważ nie można go sterylizować w autoklawie. Z tego powodu jest przygotowywany i dodany do medium już sterylizowanego.

Niektóre domy komercyjne sprzedają 1% rozwiązanie telurytu potasu gotowe do użycia. Jeśli chcesz przygotować się w laboratorium, postępuj w następujący sposób:

Waż 1.0 GR z tellurytu potasu i mierz 100 ml wody destylowanej. Rozpuść teluryt potasu w części wody, a następnie uzupełnij ilość wody, aż osiągnie 100 ml. Sterylizuj rozwiązanie metodą filtracji.

Baza agarowa Vogel-Johnson

Zważyć 60 gr z odwodnionego pożywki i rozpuść się w 1 litorze wody destylowanej. Mieszanina jest podgrzewana do gotowania, aby pomóc w pełnym roztworze. Podczas procesu rozpuszczania medium jest często mieszane.

Sterylizuj w autoklawie 15 funtów ciśnienia i 121 ° C przez 15 minut. Wyjmij z autoklawu i odstawić, aż medium osiągnie przybliżoną temperaturę od 45 do 50 ° C. Dodaj 20 ml roztworu telurytu potasu wcześniej przygotowanego na 1%.

Wymieszaj i wlej sterylne płytki Petriego. Niech się zestali i zamawiaj w odwróconej płycie.

Ostateczne pH przygotowanej pożywki musi wynosić 7,2 ± 0,2.

Przed siewem próbki musisz poczekać, aż płyta przyjmie temperaturę środowiska.

Kolor przygotowanego medium jest czerwony.

Używać

Chociaż można go użyć do izolacji S. aureus W każdym rodzaju próbek jest stosowany najczęściej do analizy mikrobiologicznej produktów farmaceutycznych, kosmetyków i żywności.

Zaleca się gęsty inokulum. Siew można wykonać poprzez wysiłek platynową uchwytem lub powierzchnią za pomocą szpatułki Drigalski.

Płytki inkubuje się w 35-37 ° C przez 24 do 48 godzin w aerobiozie.

QA

Aby wykonać kontrolę jakości w środowisku Vogel-Johnson, możesz użyć następujących kontroli szczepów:

Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 o Proteus mirabilis ATCC 43071.

Oczekiwany wynik jest następujący: dla szczepów S. aureus zadowalający wzrost z czarnymi kolonami otoczonymi żółtymi medium. Dla S. naskórka Regularny wzrost z półprzezroczystymi lub czarnymi kolonami otoczonymi czerwonymi medium.

Również I. coli Oczekuje się, że nastąpi całkowite zahamowanie i dla Proteus mirabilis częściowe lub całkowite hamowanie; Jeśli rośnie, nie zrobi tego ledwo, a kolonie będą czarne otoczone czerwoną połową koloru.

Bibliografia

1. BD Laboratories. VJ (Vogel i Johnson Agar). Dostępne na: BD.com
2. Britania Laboratories. Vogel-Johnson Agar. Dostępne na: Britanialab.com