BHI Agar What Is, fundament, przygotowanie, używa

On BHI Agar o Infuzja serca mózgu. Jest to pożywna solidna pożywka hodowlana. W języku hiszpańskim nazywamy go agarem sercowym w ciele mózgu. Jest to nieselektywne pożywkę hodowlaną, co oznacza, że ​​można opracować wszelkiego rodzaju bakterie Gram Pozytywne i gramowe, a także niektóre drożdże i grzyby nitkowate.

Składa się z wlewu mózgu i serca cielęciny, hydroliza tkanek zwierzęcych.

Należy zauważyć, że agar BHI jest jednym z najczęstszych pożywek hodowlanych w laboratoriach bakteriologii. Można go używać bez suplementów jako podstawowej, subiektywnej kolonii uzyskanych w innych mediach selektywnych lub do utrzymania szczepów w laboratorium.

Z drugiej strony jest to idealny sposób na wykorzystanie jako podstawa w przygotowaniu wzbogaconych mediów, takich jak agar krwi i agar czekoladowy. Oba ideały do ​​izolacji wymagających mikroorganizmów z odżywczego punktu widzenia. Należy jednak wziąć pod uwagę, że ponieważ zawiera glukozę, nie nadaje się do obserwacji wzorów hemolizy.

Podobnie, agar BHI można wykorzystać do przygotowania specjalnych środków do izolacji patogennych mikroorganizmów o trudnym wzroście w pospolitych pożywkach, w tym: Haemophilus sp, Francisella tularensis, Corynebacterium dyftheriae i histoplasma capsulatum.

Z dodatkiem antybiotykowym agar BHI staje się selektywnym pożywką do izolacji grzybowej.

Podstawa

Jest to pożywne pożywki hodowlane do izolowania umiarkowanie wymagających mikroorganizmów, zdolności do zwiększenia wzbogacenia o dodanie krwi i innych pożywnych suplementów.

Jest to nie -selektywne pożywkę hodowlaną, zatem pozwala na wzrost większości pozytywnych i gramowych bakterii ujemnych, a także niektórych grzybów. Może jednak stać się selektywne wraz z dodaniem antybiotyków.

Pożyód zawiera wlew mózgu i sercu cielęciny, zhydrolizowaną tkankę zwierzęcą i zhydrolizowaną tkankę kazeinową trzustki; Wszystkie te związki działają jako źródła witamin, aminokwasów, azotu i węgla.

Może ci służyć: flora i fauna Entre Ríos: Reprezentatywne gatunki

Glukoza jest węglowodanem, który zapewnia energię mikroorganizmom po fermentacji. Podczas gdy chlorek sodu i fosforan disodem utrzymują równowagę osmotyczną i zapewniają pH bliski neutralności. Wreszcie, agar nadaje solidną spójność środowiska.

Przygotowanie

Waż 52 gramów odwodnionej pożywki i rozpuszcza się w litrach wody destylowanej. Weź mieszaninę do źródła ciepła, aż się zagotuje, często mieszając się podczas procesu rozpuszczania.

Możesz przygotować kliny lub płytki agarowe BHI bez dodatków.

Kliny

Aby przygotować klin, podawaj przygotowanie, aż wypełnią połowę każdej rurki, przykryć i sterylizować w autoklawie w 121 ° C przez 15 minut, gdy idzie spać na podstawie, aż się zestalili. Następnie trzymaj w lodówce do czasu użycia.

Kliny BHI na bakterie. Źródło: Zdjęcie wykonane przez autora MSC. Marielsa Gil.

Talerze

Rozpuszczona mieszanina wynosi autoklaw w 121 ° C przez 15 minut, gdy opuszcza ją do ostygnięcia do 50 ° C i podawane jest 20 ml pożywki w sterylnych płytach Petriego. Mogą się zestalić, zainwestować i przechowywać w lodówce, dopóki nie używają. Pozwól płytom przejmować temperaturę otoczenia przed siewem.

Średnie pH musi wynosić 7,4 ± 0,2.

Nieprzeproszone medium to beżowe i przygotowane jest lekkie bursztyn.

Agar krwi

Po sterylizacji pożywki ochłodzić się do przybliżonej temperatury 45 do 50 ° C, w tym czasie dodaj krew (50 ml), delikatnie wymieszaj, aby homogenizować i podawać 20 ml na każdej płycie Petriego. Jeśli na płycie powstają bąbelki, jaśniejszy płomień na pęcherzykach, aby je usunąć.

Podobnie, specjalne media można przygotować, dodając odpowiednie dodatki, gdy mieszanina osiągnie temperaturę od 45 do 50 ° C.

Może ci służyć: możliwości fizyczne

Medium jest wiśniowe.

Aplikacje

Używać bez suplementów

Agar BHI bez dodatków jest przydatny jako pierwotna uprawa i zasila czyste szczepy mikroorganizmów niewiele lub umiarkowanie wymagające do późniejszej identyfikacji.

Ponieważ jest to lekkie pożywkę, jest idealny do obserwacji pigmentów, a także przez nie zawierające substancje interferencyjne, niektóre testy biochemiczne, takie jak oksydaza i katalaza, lub montaż innych testów biochemicznych z kolonii z tego agaru.

Podobnie agar BHI jest szeroki.

Płytki lub kliny posadzone przez powierzchnię ze szczepami bakteryjnymi inkubowano w 37 ° C przez 24 do 48 godzin. Podczas gdy w grzybach czas temperatury i inkubacji będzie zależeć od rodzaju poszukiwanego grzyba.

Jako agar podstawowy do przygotowania innych mediów

Dzięki tej bazie możesz przygotować wzbogacone i selektywne media.

Wzbogacony

Jego główną funkcją jest służenie jako podstawa w przygotowaniu rutynowej krwi w laboratoriach mikrobiologicznych. Szczególnie podstawa BHI sprzyja izolacji szczepów Streptococcus sp. Ma jednak niedogodność, że nie jest wystarczająca do obserwacji wzorców hemolizy przez zawieranie glukozy.

Jest również stosowany w przygotowaniu krwi królika lub krwi Haemophilus sp. Aby uzyskać lepsze wyniki, możesz dodać suplement wzbogacania (ISavalex).

Jeśli próbki pochodzą z dróg oddechowych do agar Haemophilus sp.

Z drugiej strony możesz przygotować krew (jagnię lub człowiek) z Cistiną Tellurito, aby odizolować Corynebacterium dyftheriae. Podobnie jest przydatny do przygotowywania krwi królika, z agregatem cistiny i glukozy do izolacji Francisella tularensis.

Siew płytek agarowych krwi odbywa się przez wyczerpanie i inkubowany w 35-37 ° C przez 24-48 godzin w mikroaerofilii (5-10% CO₂).

Może ci służyć: drzewo filogenetyczne: typy i ich cechy, przykłady

Selektywny

To medium z agregatem antybiotyków może zastąpić agar Sabouraud na izolację grzybową.

Agar BHI w połączeniu z chloramfenikolem - gentamycyną lub penicyliną - streptomycynę i krew konna jest idealna do izolacji Histoplasma capsulatum.

W zależności od mikroorganizmu, który ma na celu odizolowanie inkubacji w 35-37 ° C lub w temperaturze pokojowej w aerobiozie. Czasami konieczne jest inkubacja w obu zakresach temperatur, używając do tego 2 płyt.

Niektóre grzyby Trichophyton mentagrophytes Należy je inkubować w temperaturze pokojowej przez okres do 7 dni.

QA

Z każdej przygotowanej działki zaleca się inkubacja 1 płyty lub klinu w 37 ° C przez 24 godziny i sprawdzenia, czy nie ma wzrostu; Szczególnie jest to ważne przy przygotowywaniu krwi, ponieważ jest to łatwe do zanieczyszczenia medium.

Z drugiej strony jakość pożywki można ocenić, zaszczepiając znane lub certyfikowane szczepy wzorców i obserwować jego rozwój.

W tym sensie, aby ocenić agar BHI bez dodatków, możesz użyć szczepów Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923 o Candida albicans ATCC 10231. 37 ° C inkubuje się w aerobiozie przez 24 do 48 godzin. We wszystkich przypadkach oczekuje się zadowalającego wzrostu.

Aby ocenić płytki agarowe krwi  Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 lub Trichophyton mentagrophytes ATCC 9533.

Szczepy bakteryjne inkubuje się w 37 ° C w mikroaerofilii przez 24 godziny, podczas gdy grzyb inkubuje się w temperaturze pokojowej w wilgotnej komorze do 7 dni. We wszystkich przypadkach oczekuje się zadowalającego wzrostu.

Bibliografia

1. Britania Laboratories. Agar wlewu serca. Dostępne na: Britanialab.com.
2. BD Laboratories. Agar wlewu serca (BHI). Dostępne na: BD.com.