Proste barwienie
- 1002
- 110
- Pani Gilbert Stolarczyk
Co to jest proste barwienie?
Proste barwienie Jest to szybka i prosta procedura barwienia, w której używany jest pojedynczy barwnik, więc nazywa się to prostym. Jest używany głównie do określenia morfologii i organizacji komórek obecnych w próbce.
Oczywiście komórki nie mają koloru, więc konieczne jest ich widoczne w jakiś sposób, gdy są obserwowane w mikroskopie.
Należy podkreślić, że barwniki używane w prostym barwieniu muszą być podstawowe z dodatnim obciążeniem (kationowym), aby mogły spontanicznie łączyć się z cytoplazmie ściany i komórkowej.
Te struktury komórkowe są naładowane ujemnie. Dlatego barwnik, dodatnio naładowany, jest przyciągany do komórek i łączy je spontanicznie. Zatem wszystkie komórki obecne w próbce są szybko zabarwione.
Kolorowanki w prostym barwieniu
Istnieje kilka podstawowych barwników, które można zastosować w laboratorium mikrobiologii. Najczęściej używane to:
- Błękit metylenowy.
- Krystaliczny fiolet.
- Malachitowa zieleń.
- Podstawowy fuchsin.
Wszystkie te barwniki działają dobrze w bakteriach, ponieważ mają jony kolorowe (chromofory) z dodatnim obciążeniem (kationowym).
Czasy barwienia dla większości barwników są stosunkowo krótkie. Zasadniczo wahają się od 30 sekund do 2 minut, w zależności od powinowactwa barwnika.
Należy pamiętać, że przed farbowaniem próbki przez proste zabarwienie należy ją przedłużyć i naprawić do szklanego arkusza (zjeżdżalnia). Próbka rozszerzona i stała nazywa się rozmazem.
Procedura
Krok 1
Połóż zjeżdżalnię na półce do barwienia i nałóż pożądany barwnik. Opuść odpowiedni czas.
Może ci służyć: grupa parafiletycznaZwykle proste barwienie zajmuje kilka sekund lub kilka minut, w zależności od koloru kolorowania.
Obserwacja
W tym etapie ważne jest, aby nie przekroczyć zalecanego czasu zastosowanego barwnika, ponieważ kryształy można uformować w arkuszu, wytwarzając tak zwane „artefakty”, które zniekształcają morfologię komórek.
Krok 2
Ostrożnie umyj rozmaz zjeżdżalni wodą destylowaną z butelki lub wodą z kranu, która płynie powoli, aż spływ stanie się przezroczysty. Ogólnie rzecz biorąc, zajmuje to od 5 do 10 sekund.
Obserwacja
Nie stosuj prądu wody bezpośrednio na zapach, aby zapobiec sile tego samego uszkodzenia.
Jeśli nie ma wody destylowanej, woda z kranu może być użyta bez problemu, ponieważ nie wpłynie ona na wynik barwienia.
Krok 3
Suj zjeżdżalnię z chłonnym ręcznikiem papierowym w jednym sensie i bez pocierania. Upewnij się, że dolna część slajdu jest czysta.
Krok 4
Obserwuj farbowane rozmaz w mikroskopie. Zacznij od najdalszych celów właściwego zlokalizowania obszaru, który chcesz obserwować bardziej szczegółowo. Zmień cel, aby zbliżyć się do próbki.
Obserwacja
Aby użyć celu z największym wzrostem (normalnie 100x) oleju zanurzenia, ponieważ pomaga to lepiej przenikać światło i że obraz wygląda bardziej wyraźnie. Nie jest konieczne użycie osłony.
Krok 5
Na koniec odrzuć wszystkie próbki w odpowiednim pojemniku, który jest należycie oznaczony jako „ryzyko biologiczne”.
Aplikacje
- Obserwacja morfologii komórkowej.
- Obserwacja próbek w laboratoriach chemicznych, w celu ustalenia obecności bakterii, wirusów itp.
- Zidentyfikuj czynniki zakaźne i poprawnie zdiagnozuj.
- Jako niezbędne narzędzie w mikrobiologii.
- Wiedzieć, czy bakteria ma kapsułkę, czy nie, i wiedzieć, do jakiego rodzaju należy.
Bibliografia
- Zastosowania mikrobiologiczne: Podręcznik laboratoryjny w ogólnej mikrobiologii. Firmy McGraw-Hill.
- Harisha, s. Wprowadzenie do praktycznej biotechnologii. Media Firewall.