Proste barwienie

Co to jest proste barwienie?

Proste barwienie Jest to szybka i prosta procedura barwienia, w której używany jest pojedynczy barwnik, więc nazywa się to prostym. Jest używany głównie do określenia morfologii i organizacji komórek obecnych w próbce.

Oczywiście komórki nie mają koloru, więc konieczne jest ich widoczne w jakiś sposób, gdy są obserwowane w mikroskopie.

Należy podkreślić, że barwniki używane w prostym barwieniu muszą być podstawowe z dodatnim obciążeniem (kationowym), aby mogły spontanicznie łączyć się z cytoplazmie ściany i komórkowej.

Te struktury komórkowe są naładowane ujemnie. Dlatego barwnik, dodatnio naładowany, jest przyciągany do komórek i łączy je spontanicznie. Zatem wszystkie komórki obecne w próbce są szybko zabarwione.

Kolorowanki w prostym barwieniu

Istnieje kilka podstawowych barwników, które można zastosować w laboratorium mikrobiologii. Najczęściej używane to:

• Błękit metylenowy.
• Krystaliczny fiolet.
• Malachitowa zieleń.
• Podstawowy fuchsin.

Wszystkie te barwniki działają dobrze w bakteriach, ponieważ mają jony kolorowe (chromofory) z dodatnim obciążeniem (kationowym).

Czasy barwienia dla większości barwników są stosunkowo krótkie. Zasadniczo wahają się od 30 sekund do 2 minut, w zależności od powinowactwa barwnika.

Należy pamiętać, że przed farbowaniem próbki przez proste zabarwienie należy ją przedłużyć i naprawić do szklanego arkusza (zjeżdżalnia). Próbka rozszerzona i stała nazywa się rozmazem.

Procedura

Krok 1

Połóż zjeżdżalnię na półce do barwienia i nałóż pożądany barwnik. Opuść odpowiedni czas.

Zwykle proste barwienie zajmuje kilka sekund lub kilka minut, w zależności od koloru kolorowania.

Obserwacja

W tym etapie ważne jest, aby nie przekroczyć zalecanego czasu zastosowanego barwnika, ponieważ kryształy można uformować w arkuszu, wytwarzając tak zwane „artefakty”, które zniekształcają morfologię komórek.

Krok 2

Ostrożnie umyj rozmaz zjeżdżalni wodą destylowaną z butelki lub wodą z kranu, która płynie powoli, aż spływ stanie się przezroczysty. Ogólnie rzecz biorąc, zajmuje to od 5 do 10 sekund.

Obserwacja

Nie stosuj prądu wody bezpośrednio na zapach, aby zapobiec sile tego samego uszkodzenia.

Jeśli nie ma wody destylowanej, woda z kranu może być użyta bez problemu, ponieważ nie wpłynie ona na wynik barwienia.

Krok 3

Suj zjeżdżalnię z chłonnym ręcznikiem papierowym w jednym sensie i bez pocierania. Upewnij się, że dolna część slajdu jest czysta.

Krok 4

Obserwuj farbowane rozmaz w mikroskopie. Zacznij od najdalszych celów właściwego zlokalizowania obszaru, który chcesz obserwować bardziej szczegółowo. Zmień cel, aby zbliżyć się do próbki.

Obserwacja

Aby użyć celu z największym wzrostem (normalnie 100x) oleju zanurzenia, ponieważ pomaga to lepiej przenikać światło i że obraz wygląda bardziej wyraźnie. Nie jest konieczne użycie osłony.

Krok 5

Na koniec odrzuć wszystkie próbki w odpowiednim pojemniku, który jest należycie oznaczony jako „ryzyko biologiczne”.

Aplikacje

• Obserwacja morfologii komórkowej.
• Obserwacja próbek w laboratoriach chemicznych, w celu ustalenia obecności bakterii, wirusów itp.
• Zidentyfikuj czynniki zakaźne i poprawnie zdiagnozuj.
• Jako niezbędne narzędzie w mikrobiologii.
• Wiedzieć, czy bakteria ma kapsułkę, czy nie, i wiedzieć, do jakiego rodzaju należy.

Bibliografia

1. Zastosowania mikrobiologiczne: Podręcznik laboratoryjny w ogólnej mikrobiologii. Firmy McGraw-Hill.
2. Harisha, s. Wprowadzenie do praktycznej biotechnologii. Media Firewall.