Bulion tetrationate What Is, fundament, przygotowanie, używa

On Bulion tetrationate Bulion o tt jest selektywnym podłożem hodowli płynnej do wzbogacania i odzyskiwania szczepów z rodzaju Salmonella. Został stworzony przez Müellera, a później zmodyfikowany przez Kauffmanna, więc są tacy, którzy nazywają go bulionem Müellera-Kauffmanna.

Oryginalna pożywka zawierała białko Peptonas, węglan wapnia i tiosiarczan sodu. Kauffmann dodał sole żółciowe i stworzył kolejną metodę z jasnozielonym. Substancje te hamują wzrost coli, pozostawiając wolną pożywkę do rozwoju bakterii patogennych, w tym przypadku salmonella.

Agregat roztworu idureja jodu w bulionie Tetrationato. Źródło: Manuel Almagro Rivas [CC BY-SA 4.0 (https: // creativeCommons.Org/licencje/nabrzeże/4.0)]

Modyfikacja była bardzo skuteczna, ponieważ wrażliwość medium znacznie wzrosła. Dlatego jest obecnie przydatny do wyszukiwania salmonellas w dowolnym rodzaju próbce, ale szczególnie w przypadku odchodów stałych lub płynnych i żywności.

Jego przygotowanie składa się z dwóch faz; Medium komercyjne jest podstawą do przygotowania bulionu Tetrationato, a później, aby tetrationato można było utworzyć rozwiązanie jodu, które uzupełnia medium.

American Public Health Association (APHA) zaleca zastosowanie bulionu tetrationate uzupełnionego jasnozieloną do wzbogacenia próbek w poszukiwaniu salmonelli, ponieważ jest bardziej selektywny niż bulion tetrationate i bulion selenito.

Zasadniczo bulion Tetrationato jest idealny, gdy obecność bakterii z rodzaju Salmonella jest podejrzana w małych ilościach lub które są źle traktowane przez narażenie na substancje hamujące lub przez procesy przemysłowe, które minimalizują ich żywotność.

Podstawa

Obecne peptones odpowiadają digreatycznej kazeinie i digretowanej tkanki tkanki tkanki digrealnej. Stanowią one ogólnie źródło węgla, azotu i składników odżywczych do wzrostu bakteryjnego.

Może ci służyć: mastozoologia: pochodzenie, jakie badania, przykład badań

Ze swojej strony, tiosiarczan sodu reaguje z roztworem jodku, tworząc tetrationato. To hamuje wzrost coli i sprzyja rozwojowi bakterii zawierających reduktazę tetrationato enzymu, w tym płeć salmonella, ale także proteus.

Sole żółciowe działają również jako substancja hamująca większości dodatnich bakterii Grama i niektórych gramowych negatywnych (coli).

Węglan wapnia pochłania toksyczne substancje wytwarzane przez rozkład tetrationato, który tworzy kwas siarkowy. W tym sensie węglan wapnia neutralizuje kwasowość, utrzymując pH stabilnego pożywki.

W przypadku modalności z błyskotliwą zielenią substancja ta zwiększa moc selektywną bulionem tetrationatowym poprzez hamowanie innych mikroorganizmów innych niż płeć Salmonella.

Przygotowanie

-Bulion tetrationate

Roztwór jodu jodu jodurada

Ważyć:

• 6 GR jodu.
• 5 GR jodku potasu.

Jodek potasu rozpuszcza się w około 5 ml sterylnej wody destylowanej, a następnie jod dodaje się stopniowo podczas ogrzewania mieszanki. Po całkowitym rozpuszczeniu jest spłukiwanie sterylną wodą destylowaną, aż osiągnie końcową objętość 20 ml.

Pół podstawy dla bulionu Tetrationato

Waż 46 gramów odwodnionej pożywki i zawiesaj w 1 litorze sterylnej wody destylowanej. Wymieszaj i podgrzewaj do całkowitego rozwiązania, może prowadzić tylko przez kilka minut. Nie sterylizuj w autoklawie. Podstawa pożywki może ostygnąć do 45 ° C w przybliżeniu, a w tym czasie dodaje się 20 ml roztworu jodu.

Po dodaniu roztworu jodowcowego do medium, należy go natychmiast użyć. Jeśli nie chcesz używać całej mieszanki, postępuj w następujący sposób:

Może ci służyć: konkurencja wewnątrzgólna: cechy, typy i przykłady

10 ml pożywki podstawowej jest rozmieszczone w rurkach i tylko dla tych, którzy zostaną zaszczepione próbkami, dodaje się 0,2 ml roztworu jodurowanego.

Jednak ci, którzy nie będą używani, mogą być nadal zapisane w lodówce, ponieważ medium nie jest sterylizowane, ideałem jest przygotowanie dokładnej potrzebnej ilości.

Kolor pożywki przed dodaniem roztworu jodku jodku jest mleczny biały z białym osadem, a po agregatu jest brązowy z gęstym osadem. Zaobserwowany osad jest normalny i odpowiada węglanowi wapnia, który nie jest rozpuszczony. Ostateczne pH pożywki wynosi 8,4 ± 0,2.

-Wariant bulionu tetrationate z jasnozieloną

Aby przygotować bulion Tetrationato z jasnozielonym, wszystkie kroki opisane powyżej są wykonywane, ale dodatkowo zostanie dodany do mieszaniny 0,1% jasnozielonego roztworu.

Lśniąca zieleń

To rozwiązanie jest przygotowywane w następujący sposób:

Ważą 0,1 GR jasnozielonej i zawiesić w 100 ml wody destylowanej. Rozgrzewać się do gotowania, aby osiągnąć całkowite rozwiązanie. Zapisz w bursztynowej butelce.

Używać

W przypadku próbek kału (coproulture) protokół jest następujący:

Zaszczepić 1 gr stałych odchodów lub 1 ml cieczy w rurce z 10 ml bulionu tetrationanowego gotowego do użycia. Silnie rozciągnij i inkubuj aerobiozę w 43 ° C przez 6-24 godzin.

Następnie weź podwielokrotność od 10 do 20 µl bulionu i wzroście w selektywnej pożywce dla Salmonelli, takiego jak Agar SS, Agar XLD, jasnozielony agar, hektoński agar jelitowy,.

Równolegle selektywne środki na salmonellę należy zaszczepić bezpośrednią próbką (kale) bez wzbogacenia. W przypadku próbek wymazu doododobawczego pobierz materiał zebrany w rurce i postępuj w sposób opisany powyżej.

Może ci służyć: lipogeneza: cechy, funkcje i reakcje

W przypadku próbek pokarmu Ważę 10 GR z pokarmu stałego lub 10 ml płynnej żywności i zaszczepienie butelki z 100 ml bulionu tetrationate gotowe do użycia. Postępuj w taki sam sposób, jak opisany powyżej, ale inkubuj 37 ° C.

Jak widać, związek między próbką a bulionem zawsze będzie wynosił 1:10.

QA

Aby przetestować pożywkę hodowlaną, możesz użyć znanych szczepów. Najczęściej używane są szczepy certyfikowane ATCC.

Szczepy do użycia są Salmonella Typhimurium ATCC 14028, Salmonella Abony DSM 4224, Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Escherichia coli ATCC 25922, Enterococcus faecalis ATCC 19433 i Staphylococcus aureus ATCC 25923.

W przypadku szczepów Salmonella oczekuje się doskonałego rozwoju Escherichia coli Może mieć słaby lub regularny rozwój, a szczepy dodatnie Gram (enterococcus i gronkowce) są częściowo lub całkowicie zahamowane.

Zalecenia

-Ponieważ ta pożywka nie hamuje wzrostu proteusa, niektóre laboratoria zwykle umieszczają 40 mg/l novobiocyny, aby uniknąć rozwoju tego szczepu drobnoustrojowego. Antybiotyk należy dodać przed roztworem jodo jodu.

-Po przygotowaniu pożywki, w tym roztwór jodu jodu, nie powinno ono spędzać więcej niż 2 godziny na zaszczepienie.

-W momencie rozpowszechniania pożywki w probówkach mieszanina musi być homogenizowana w sposób ciągły, aby ponownie zawieszać uformowany osad.

-W mniej zanieczyszczonych próbkach próbki 35-37 ° C są inkubowane, a w bardzo zanieczyszczonych próbkach zaleca się inkubację w 43 ° C.

Bibliografia

1. BBL Media. 2005. Przygotowany w rurce do uprawy gatunków Salmonella.
2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnoza mikrobiologiczna Bailey & Scott. 12 ed. Pan -american Editorial S.DO. Argentyna.