Bilis Agarc

On Bilis Agulina Jest to selektywne i różnicowe pożywkę do hodowli stałej. Jest stosowany jako test diagnostyczny w celu ustalenia zdolności pewnego mikroorganizmu uprawy w pożywce, który zawiera żółć, a także rozkładanie sculiny glikozydowej w rzeźby i glukozie.

Ten test diagnostyczny służy do odróżnienia gatunków od rodzaju Streptococcusa należącego do grupy D (dodatnia rzeźba żółciowa), od innych grup Streptococcus, które reagują negatywnie przed tym testem.

Bilis Bilis Plate, sembrated ze szczepem enterococcus (test dodatni). Źródło: Brak, który można odczytać, nie dostarczył autora. Przyjął Philippinjl (na podstawie roszczeń dotyczących praw autorskich). [Domena publiczna]

Należy zauważyć, że niektóre paciorkowce grupy viridans mogą hydrolizować.

Z drugiej strony, średnia żółć jest również przydatna do diagnozy Listeria monocytogenes lub gatunki Aerococcus sp, Ponieważ te mikroorganizmy są pozytywną żółcią rzeźbiącą.

Agar w rzeźbieniu składa się z peptonu, ekstraktu mięsnego, żółci wół, rzeźbiarzy, cytrynianu żelaza, agaru i wody destylowanej. Niektóre domy komercyjne obejmują sodą azyda w ramach składu medium.

Medium można przygotować w laboratorium, jeśli masz wszystkie związki osobno lub można je przygotować z komercyjnego środowiska odwodnionego.

[TOC]

Podstawa

Medium rzeźbiarskie zawiera peptones i ekstrakt mięsny, oba związki zapewniają niezbędne substancje odżywcze do wzrostu mikroorganizmów.

Zawiera także scullin; Związek ten jest glukó utworzony przez połączenie prostego monosacharydu (glukozy) ze związkiem zwanym 6,7-dihydroksymaryną lub scupply (Agluconon), wraz z wiązaniem acetalowym lub glukozydowym.

Test opiera się na wykazaniu, czy bakterie są w stanie hydrolizować. Jeśli tak się stanie, rzeźba jest podzielona na odkup i glukozę. Skuletyna reaguje z żelazem obecnym na środku, tworząc ciemnobrązowy, prawie czarny związek.

Może ci służyć: termoregulacja: fizjologia, mechanizmy, typy i zmiany

Oznacza to, że cytrynian żelazowy działa jako deweloper reakcji. Ta funkcja sprawia, że ​​rzeźbiący agar żółciowy jest medium różnicowym.

Z drugiej strony żółć jest inhibitorem, który zapobiega wzrostowi niektórych mikroorganizmów, dlatego bakterie przed rozwojem sculiny muszą być w stanie rosnąć w obecności żółci. Dlatego to medium jest uważane za selektywne.

Bakterie, które mogą się rozwijać w tym środowisku, to głównie te, które żyją w środowisku jelitowym.

W tym sensie niektóre domy komercyjne dodają do pożywki azidowej sodu, aby dodatkowo hamować wzrost gramu ujemne, zwiększając selektywność pożywki dla wzrostu Streptococcus.

Wreszcie, agar nadaje solidną spójność środowiska, a woda jest rozpuszczalnikiem związków.

Przygotowanie

Domowe przygotowanie rzeźby żółciowej

Ważyć:

5 g peptonów

3 g ekstraktu mięsnego

40 g żółci wół

1 g rzeźby

0,5 GR żelaznego cytrynianu

15 g agaru

1000 ml wody destylowanej

W przypadku dodania azid sodu.

Rozpuść składniki w litr wody destylowanej, ogrzewać, aż związki rozpuści się w całości. Rozłóż 5 ml w probówkach z wiekiem gwintowym 16 x 125 mm. Autoklawar w 121 ° C, 15 funtów przez 15 minut.

Wyjmij z autoklawu i przechyl rurki na podporach, aby agar zestala się w szerokim szczycie fletu.

Trzymaj w lodówce do czasu użycia. Przynieś temperaturę pokojową przed siewem.

Może ci służyć: izolacja geograficzna

Możesz także przygotować płytki rzeźby żółciowej; W tym przypadku cała mieszanina jest autoklawą w feloli, a następnie rozmieszczona w sterylnych płytkach Petriego. Pozwalają sobie umacniać i trzymać w lodówce.

Średnie pH musi wynosić 6.6 ± 0,2.

Przygotowanie Bilis Agulina z mediów komercyjnych

Ważyć kwotę określoną przez wkładkę. Może to różnić się w zależności od domu komercyjnego do drugiego. Następnie przejdź do procedury wyjaśnionej powyżej.

Średnie pH musi wynosić 6,6 ± 0,2. Kolor odwodnionego pożywki to lekki beż, a przygotowana pożywka jest ciemna bursztyn.

Half Trile Commercial Sculpt. Źródło: Zdjęcie wykonane przez autora MSC. Marielsa Gil.

Aplikacje

Medium rzeźbiące jest używane głównie do różnicowania paciorkowca grupy D (żółć rzeźby dodatniej), od reszty grup Streptococcus (negatywna żółć rzeźby).

Jeśli test wzrostu jest połączony w nadwozie bulion z testem żółci rzeźbienia, można zidentyfikować identyfikację specjalnej grupy Streptococcus grupy D zwanej Enterococcus.

Ta specjalna grupa Streptococcus należy do grupy D wspomnianego gatunku i jest w stanie zhydrolizować 6,5%sodu), właściwość, która robi różnicę.

Dlatego streptococcus ten hydrolizator.

Posiany

Zaszczepić medium, najlepiej z 24-godzinnego czystego bulionu Todd-Hewitt.

Dodaj 2 krople na średniej powierzchni z pipetą pasteurową i rozciągnij na środku z platynową uchwytem.

Może ci służyć: pelagic: Charakterystyka, flora, fauna

Inkubuj w 35 ° C przez 48 godzin, podczas gdy czas inkubacji jest spełniony, można monitorować, czy istnieje pozytywna reakcja. Jeśli pod koniec czasu reakcja pozostaje ujemna, można inkubować do ukończenia 72 godzin.

Interpretacja

Pozytywna reakcja: Wygląd ciemnobrązowego koloru, prawie czarny w piku fletu (w przypadku testu rurki) lub zaczernienie agaru wokół kolonii (w przypadku testu płyty).

Reakcja negatywna: Nie ma zaciemnienia pożywki lub pojawia się czarny kolor w mniej niż połowie rurki po 72 godzinach inkubacji. Z drugiej strony wzrost bakterii pośrodku bez pojawienia się czarnego koloru należy uznać za test ujemny.

QA

Aby ocenić jakość medium, szczep Enterococcus faecalis ATCC 29212 jako kontrola pozytywna i odkształcenie Streptocococus nie należące do grupy D jako kontrola negatywna.

Ograniczenia

-Pożywki, które nie zawierają azydek sodu, pozwalają na wzrost gramu ujemne bachilli. Niektóre z nich mogą pobudzić medium.

- Niektóre domy komercyjne dodają niskie stężenie żółci (10%) i z tego powodu niektóre paciorkowce, które nie należą do grupy D, mogą rozwinąć się w środowisku i hydrolizują sculin, co może generować błędy w interpretacji.

Bibliografia

1. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnoza mikrobiologiczna. Ed. Pan -american Editorial S.DO. Argentyna.
2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnoza mikrobiologiczna Bailey & Scott. 12 ed. Pan -american Editorial S.DO. Argentyna.
3. Mac Faddin J. (2003). Testy biochemiczne identyfikacji bakterii znaczenia klinicznego. Wydanie trzecie. Pan -american Editorial. Buenos Aires. Argentyna.
4. Laboratorium. Britannia. Rzeźba żółci z agarem Azida. 2015. Dostępne na: Britanialab.com
5. „Agar rzeźby Bilis." Wikipedia, bezpłatna encyklopedia. 22 sierpnia, 17:30 UTC. 22 kwietnia 2019, 17:35. Jest.Wikipedia.org.
6. BD Laboratories. Zachwyty agarowe Eculin Eculin. 2015. Dostępne na: BD.com
7. Neogen Laboratories. Bilis Agulina. Dostępne na: Foodsafety.Neogen.com