Charakterystyka safraniny, stosowanie, techniki, toksyczność

Safranine Jest to barwnik meriquinoidowy, nazwany do posiadania w strukturze chemicznej 2 pierścieni benzenowych i 2 pierścieni chinoidowych, przy czym te ostatnie są tymi, które zapewniają czerwony kolor.

Nazywa się to również safraniną lub podstawowym czerwonym dimetylem w postaci podsumowującej, ponieważ jej nazwa naukowa to 3,7-diamino-2,8-dimetylo-5-fenylo-fenylo-fenyll₂₀H₁₉N₄ Cl.

Struktura chemiczna safraniny wskazującej na pierścienie benzenu i chinoidów/ wodny roztwór safraniny. Źródło: Neurotoger [domena publiczna] pod redakcją MSC. Marielsa Gil/Lhchem [CC BY-SA 3.0 (https: // creativeCommons.Org/licencje/by-sa/3.0)]

Istnieje wariant zwany trimethyle-safraniną, ale nie ma znaczącej różnicy między obiema substancjami.

Safranina jest barwnikiem monochromatycznym i, zgodnie z charakterystyką wzoru chemicznego, jest substancją ładunku dodatnią. Dlatego ma powinowactwo z negatywnie załadowanymi strukturami. Struktury te będą barwione na czerwono.

Ta właściwość zapewnia zastosowanie w wielu technikach histologicznych do barwienia różnych struktur komórkowych, zarówno z organizmów eukariotycznych, jak i prokariotycznych.

Safranina jest stosowana jako barwnik kontrastowy w ważnych i dobrze znanych technikach stosowania w bakteriologii. Te techniki to: barwienie Gram-Huckera, barwienie Schaeffer Fulton do barwienia zarodników lub bakteryjne, między innymi.

[TOC]

Charakterystyka

Kolor szafranu (przyprawy uzyskane z piętnowania kwiatu Crocus sativ) była inspiracją do umieszczania nazwy tego barwnika. Z terminu szafran pochodzi nazwa safranine. Wynika to z wielkiego podobieństwa między kolorem szafranu a zabarwieniem, które zapewnia ten barwnik.

Safranina osiąga się jako kryształy lub proszek, oba prezentacje są rozpuszczalne w wodzie. Dye Safranine nie ma zapachu. Plamy czerwone struktury. Struktury, które przyciągają barwnik safraniny, nazywane są safranofilami.

Strukturalnie, safranina jest złożona, ma dwa pierścień benzenu do końca, a pośrodku dwa pierścienie chinoidowe znajdują⁺. Środkiem struktury jest system odpowiedzialny za zapewnienie koloru. Według tej cechy barwnik ten jest klasyfikowany w ramach kategorii II.

Używać

Safranina służy do barwienia różnych struktur. Szczególnie podkreśla komórki Kulchitsky'ego obecne w przewodzie pokarmowym, zwane także komórkami enterokromofin.

Jest w stanie farbować mikroorganizmy należące do rodziny Rickettsiaceae. Podobnie jest stosowany w różnych technikach, takich jak metoda Kostera, zmodyfikowana stosowana do barwienia bakterii płciowych Brucella.

Z drugiej strony safranina jest stosowana w technice barwienia zarodników Fulton i w barwieniu Gram-Huckera. W obu technikach safranina działa jako barwnik kontrastowy.

Może ci służyć: Indianin

W pierwszym zarodnikach zabierają kolor zieleni Malachite, a reszta struktur jest czerwona przez safraninę. W drugim, bakterie gramowe ujemne tracą kolor fioletowego szkła na etapie przebarwienia, dlatego safranina jest tą, która plamuje bakterie czerwonego ujemnego Grama.

Dodatkowo safranina jest stosowana w bakteriologii do przygotowania agaru brucella z rozcieńczeniem safraniny 1: 5000. To medium służy do odróżnienia gatunku Brucella suis reszty gatunku. Brucella melitensis I Brucella abortus rosnąć w tym medium, ale B. Suis Jest hamowany.

W polu rolnym safranina została zastosowana na poziomie 2,25% i rozcieńczona 1:10 do barwnika próbek trzpienia z rośliny trzciny cukrowej.

Bakterie są powszechnie dotknięte rośliną Leifsonia Xyli Sub. Xyli, który uszkadza XileMa zakładu. Oceniane są barwione łodygi w celu ustalenia funkcji naczyń ksylemu.

Techniki w dziedzinie bakteriologii

Barwienie Castañeda dla plamy rIckettsias

Roztwór buforowy umieszcza się rozmaz krwi lub tkanki (tłumienie fosforanu pH 7,6). Można go wysuszyć spontanicznie, a następnie przykryj błękitem metylenowym przez 3 minuty i kurczące się z safraniną. Kolorowy niebieski RickettSias, kontrastujący z czerwonym tłem.

Zmodyfikowane barwienie koster dla Brucella

Wykonuje się rozmaz i flamea w zapalnice do fiksacji. Następnie jest pokryty mieszaniną 2 części nasyconej wodnej safraniny z 3 częściami roztworu KOH 1 MOL/L, przez 1 minutę. Wykonuje się pranie z wodą destylowaną i 1% fenado błękit metylenowy.

Jeśli próbka zawiera bakterie płciowe Brucella Zostaną one obserwowane pomarańczowe na niebieskim tle.

Barwienie kapsułek bakteryjnych

Wykonuje się mieszaninę zawiesiny bakteryjnej z chińskim atramentem i dodaje się safranina. Na mikroskopie wokół każdej kapsułki bakteryjnej z czerwonawą aureolą będzie obserwowana.

Może ci służyć: czyste substancje

Barwienie zarodników Schaeffer Fulton

Wykonany jest rozszerzony z zawiesiną bakteryjną. Wtedy jest przymocowane do ogrzewania. Jest pokryty 5%zielonymi malachitami, często flametem do momentu emisji pary. Proces jest powtarzany przez 6-10 minut. Na koniec jest myte wodą i wynajmuje 0,5% safraninę przez 30 sekund. Bacilli są barwione na czerwono, a zielone zarodniki.

Barwienie gram-hucker

Wydłużony z zawiesiną bakteryjną jest wykonywana i ustalona na ciepło. Lajka z fioletowym szkłem po 1 minucie jest pokryta. Następnie Lugol jest umieszczany jako roztwór mordujący na 1 minutę. Następnie jest przebarwiony alkoholem acetonowym i ostatecznie zatrudniony z safraniną przez 30 sekund.

Bakterie Gram dodatnie są barwione niebieskie fiolet i gramowe bakterie czerwonego.

Niektóre laboratoria przestały używać techniki Gram-Huckera w celu przyjęcia zmodyfikowanej techniki Gram-Kopeloffa. W tym ostatnim safranina jest zastępowana przez podstawową fuksynę. Wynika to z faktu, że safranina słabo plami gatunki rodzajów Legionella, Campylobacter I Brucella.

Techniki w obszarze histologicznym

Barwienie komórek Kulchitsky (enterocromofines)

Krój tkanki przewodu pokarmowego z chlorkiem srebra są barwione. Następnie jest przebarwiony tiosulfate sodu i ostatecznie zatrudniony z safraniną.

Komórki Kulchitysky'ego są wyróżniające się, ponieważ przedstawiają je czarno -brązowe granulki.

Barwienie do wykrywania choroby zwyrodnieniowej stawów

Safranina, ponieważ ma dodatnie obciążenie, karboksy i siarczanowe grupy glikozaminoglikanów wiążą bardzo dobrze. Są one częścią proteoglikanów, które stanowią chrząstkę stawową. W tym sensie, przy farbowaniu z safraniną lub można zidentyfikować, czy istnieje utrata chrząstki.

Utrata tkanki chrząstkowej można zmierzyć za pomocą skali Mankin lub nazywanej skalą choroby zwyrodnieniowej stawów.

Technika jest następnie wyjaśniana: cięcie histologiczne jest zanurzone w tacy z roztworem hematoksylinowym Weigerta, a następnie przepuszczany jest alkohol kwasowy i myje wodą.

Kontynuuj proces zabarwienia, zanurzając arkusz w szybkim zielonym, myje kwasem octowym, a teraz zanurzone w safraninie lub. Aby zakończyć proces, jest on odwodniony przy użyciu alkoholi w różnych stężeniach w kolejności rosnącej. Ostatni krok wymaga xileno lub xilol, aby próbka mogła wyjaśnić.

Może ci służyć: metaloidy

Arkusze są uwarunkowane balsamem Kanady lub podobne do obserwowania przy mikroskopie. 

Z tą techniką jądra są barwione na czarno, zieloną kość i chrząstkę, w której znajdują się czerwone proteoglikany.

Tincion do identyfikacji makroalg

Pérez i in. W 2003 r. Zaproponowali prostą i ekonomiczną technikę farbowania makroalg. Próbki są przygotowywane w cięciach histologicznych parafiną. Cięcia są ustawione 1% gliceryną, pozwalając sobie całkowicie sucha. Następnie umieszcza się go w ksylol, aby wyeliminować parafinę.

Cięcie jest nawodnione, co sprawia, że ​​przechodzi przez serię tace, które zawierają etanol w różnych stopniach koncentracji (kolejność malejąca), przez 2 minuty w każdym.

Następnie jest farbowany przez 5 minut z mieszaniną 3: 1 1% safraniny z 1% toluidyny niebieskiego, oba przygotowane z 50% etanolem. Mieszaninę dodaje się trzy krople kwasu pikralnego, które działa jak mordanta.

Potem znów staje się odwodniony przez tace alkoholowe, ale tym razem wznoszą się. Wreszcie jest wyjaśnione za pomocą XILOL, a próbka jest przygotowywana za pomocą balsamu Kanady, który należy zaobserwować.

Toksyczność

Na szczęście Safranine jest barwnikiem, który nie stanowi niebezpieczeństwa dla tych, którzy ją manipulują. Jest to nieszkodliwy barwnik, nie jest rakotwórczy i nie jest też łatwopalny.

W bezpośrednim kontakcie ze skórą lub błonami śluzowymi może powodować niewielkie zaczerwienienie tego obszaru, bez poważnych komplikacji. W tym celu zaleca się mycie dotkniętego obszaru dużą ilością wody.

Bibliografia

1. Garcia h. Barwnik Safranine lub. Technika zdrowotna, 2012; 1 (2): 83-85. Dostępne na: Medigraficzne.com
2. Gil m. Barwienie gramowe: podkład, materiały, technika i zastosowania. 2019. Dostępne na: Lofede.com
3. Gil m. Barwienie zarodników: podkład, techniki i zastosowania. 2019. Dostępne na: Lofede.com
4. Safranine." Wikipedia, bezpłatna encyklopedia. 7 marca 2017, 10:39 UTC. Temu 2019, 20:49 to.Wikipedia.org
5. Pérez-Cortéz S, Vera B, Sánchez C. Przydatna technika zabarwienia w anatomicznej interpretacji Graciliasis tenuifrons I Grasilaria chilesis (Rhodophyta). Bot Act. Wenez. 2003; 26 (2): 237-244. Dostępne na: Scielo.org.
6. Aleika Church, Peralta Esther Lilia, Alvarez Elba, Milián J, Matos Madyu. Stosunek funkcjonalności naczyń ksylemu i obecność Leifsonia xyli podsumowanie. Xyli. Obrót silnika. Ochrona VEG. 2007; 22 (1): 65-65. Dostępne na: Scielo.Sld