Przygotowanie mediów kulturalnych

Przygotowanie mediów hodowlanych jest metodologią rozwoju mikroorganizmów, aby je zbadać

Jakie jest przygotowanie mediów kultutycznych?

Przygotowanie mediów kulturalnych Jest to rutynowa metodologia stosowana w laboratoriach do rozwoju pożądanych mikroorganizmów. Pożywki hodowlane są stałymi, płynnymi lub pół-siodłowymi preparatami, które mają wszystkie niezbędne składniki odżywcze do rozwoju populacji drobnoustrojów.

Zasadniczo środki do uprawy mikroorganizmów są bogate w białka i aminokwasy i zwykle zawierają pewien składnik, który sprzyja wzrostowi organizmu, które chcesz zbadać, takie jak witaminy, krew, surowica, surowica, surowica, surowica,.

Nie ma środków ogólnej lub uniwersalnej kultury, ponieważ jej skład jest różny w zależności od potrzeb mikroorganizmu. Niektóre bakterie można opracować w dowolnym medium hodowlanym, ale inne mają specjalne wymagania.

Z czego to się składa?

Mikroorganizmy, takie jak grzyby i bakterie, nie mogą być badane indywidualnie ze względu na ich mikroskopijny rozmiar. Dlatego należy je kultywować w sztucznych mediach, które umożliwiają znaczny wzrost populacji.

Na przykład, jeśli chcemy zbadać bakterie, musimy zapewnić im odpowiednie warunki, aby mogły się rozprzestrzeniać i utworzyć kolonię (które można zaobserwować gołym okiem).

Przygotowanie mediów hodowlanych różni się znacznie w zależności od rodzaju mikroorganizmu, który chcesz uprawiać. Przed jego przygotowaniem należy poznać podstawowe potrzeby żywieniowe organizmu roboczego.

Najczęstsze elementy stosowane w mediach upraw zostaną opisane poniżej, aby mieć ogólne wyobrażenie o jego przygotowaniu:

Agar

Jest stosowany w uprawach jako środek żelujący i dodaje, gdy poszukiwane jest solidne lub półsolidowe medium. Pierwszym agentem zestalającym zastosowanym w przygotowaniu medialnym była żelatyna, ale w 1883 r. Agar został wprowadzony do świata bakteriologii przez W. Hesse.

Agar typu bakteriologicznego ma jako główny składnik polisacharydu złożonych konsekwencji, ekstrahowany z glonów. Ten związek jest stosowany jako zagęszczacz wspólnego jedzenia, taki jak lody i dżemy.

Jest to bardzo cenny element mikrobiologii z kilku powodów. Głównie, ponieważ mikroorganizmy nie mogą go zdegradować, upłynnia w temperaturze 100 ° C i pozostaje w stanie ciekłym, aż osiągną 45 ° C lub mniej.

W przypadku, gdy chcesz przygotować solidne medium, stężenie agarowe musi wynosić około 1,5%, podczas gdy półsolidy należy przygotować od 0,3 do 0,5%.

Płyny

Uprawa organizmów patogennych wymaga płynów ustrojowych, aby mogły się rozwijać tak, jak w ich naturalnym środowisku.

Może ci służyć: grupa protetyczna

Z tego powodu dodaje się całkowitą lub defibrykowaną krew. Płyn jest ekstrahowany ze zdrowego, a niegdyś sterylizowane zwierzę jest dodawane w pożywce hodowlanej.

Ekstrakty

Są one uzyskiwane z różnych części zwierzęcych (takich jak mięso lub wątroba) lub warzyw (nasiona) i są przetwarzane w celu uzyskania stałego koncentratu w postaci makaronu lub kurzu.

Najczęstsze są ekstrakty drożdży, słodu i mięsa.

Peptonas

Te związki organiczne są uzyskiwane przez enzymatyczną lub chemię tkanek zwierzęcych lub roślinnych. Celem jest dodanie bogatej zawartości aminokwasów, które są podstawowymi jednostkami białek.

Amortyzatory

„Bufory” lub systemy pochłaniające wstrząsy unikaj nagłe zmiany pH i pomagają utrzymać optymalny zakres, który toleruje organizm.

Większość organizmów może prawidłowo rozwinąć pH 7, chociaż niektóre bakterie wolą media alkaliczne. Istnieją jednak bakterie, które odpowiadają zmianom pH między wartościami 6 i 9.

U gatunków wrażliwych na pH uszkodzenia nie są wyrządzane przez nadmierną ilość jonów wodoru lub hydroksylowych, ale przez wzrost słabych kwasów lub zasad, które mogą przenikać do komórki.

Podobnie dodaje się wskaźniki pH, aby móc go monitorować i uniknąć odchyleń spowodowanych przez fermentacje lub inne procesy.

Cele

Głównym celem podczas przygotowywania medium kulturowego jest dodanie wszystkich niezbędnych elementów, aby umożliwić udany rozwój organizmu, który chce być izolowany. Należy zidentyfikować połączenie bardziej skutecznych składników i składników odżywczych, aby osiągnąć pożądane środki.

Zarówno przygotowanie, jak i średnie przechowywanie mają kluczowe znaczenie dla zapewnienia skutecznego wzrostu, ponieważ kroki te zależą od składu środowiska i dostępności składników odżywczych.

Należy wziąć pod uwagę, że uprawa mikroorganizmów jest zadaniem, na które wpływa kilka czynników zewnętrznych dla środowiska hodowli, takich jak intensywność odbieranego światła, temperatura i poziom kwasowości lub alkaliczność średniej.

Dlatego każda z tych zmiennych należy wziąć pod uwagę i rygorystycznie monitorować.

Rodzaje mediów

Na podstawie jego składu

Na podstawie jego składu istnieją trzy główne rodzaje upraw: środki naturalne lub empiryczne, półsyntetyczne i syntetyczne lub chemiczne.

Środowisko naturalne

W naturalnych mediach dokładna kompozycja jest nieznana. Obejmują one składniki takie jak mleko, rozcieńczona krew, soki roślinne, ekstrakty i infuzje mięs i peptones.

Ze względów ekonomicznych zwykle dodawane są komponenty niskiego poziomu, takie jak ekstrakt sojowy, surowica, melasa itp.

Może ci służyć: Wsparcie: Charakterystyka, funkcje i przykłady

Półsyntetyczne media

Nazywa się to półsyntetykiem, jeśli skład tego samego jest częściowo znany. Każde medium zawierające agar to półsyntetyczne medium.

Wśród nich mamy ziemniaki dekstrozowe, wieprzaki, agar, płatki owsiane, chwyt pepton mięsny, między innymi.

Medium syntetyczne lub chemiczne

W tym przypadku skład pożywki - jak w przypadku ilości węgla, azotu, siarki, fosforu i dowolnego innego czynnika wzrostu, jest całkowicie znany - jest całkowicie znany -.

Jest to bardzo przydatne, jeśli chcesz uzyskać powtarzalne wyniki dla innych badaczy.

W przypadku „mikroorganizmów o specjalnych wymaganiach dotyczących wzrostu” musisz dodać niezbędne komponenty. Przykładem tego typu są Lactobacillus.

Na podstawie rodzaju mikroorganizmu

W ten sam sposób istnieje kolejna klasyfikacja dla mediów hodowlanych oparta na rodzaju mikroorganizmu, który może w nim rosnąć.

Zgodnie z tą zasadą mamy następujące: ogólne środki, wzbogacenie, selektywne i różnicowe. Każdy z nich jest opisany poniżej:

Ogólne środki

Przyznają one rozwój szerokiej gamy mikroorganizmów. Jeśli jakikolwiek organizm potrzebuje specjalnych warunków dla jego wzrostu, nie będzie w stanie z powodzeniem rozwinąć się w tego rodzaju uprawach.

Media wzbogacające

Wzbogacanie oznacza wzrost pewnego rodzaju mikroorganizmu, ale nie dodano żadnej substancji, aby zapobiec rosnącemu w nim innych rodzajach drobnoustrojów.

Środki selektywne

Szukają specyficznego wzrostu mikroorganizmu, połączeń grzybów, bakterii, pierwotniaków,. Aby to zrobić, hamują rozwój innych.

Aby osiągnąć ten cel, można dodać śmiertelne związki chemiczne dla szerokiej grupy mikroorganizmów i nieszkodliwe dla zainteresowania lub dodawanie źródeł energii, które można zasymić tylko przez poszukiwane drobnoustroje.

Pożywki selektywne są stosowane, gdy pobierane są próbki medyczne w celu kultywowania pewnego patogennego mikroorganizmu. Tutaj należy sprzyjać wzrostowi patogenu i hamować rozwój normalnej flory drobnoustrojowej od pacjenta.

Na przykład agar bizmutowy siarczkowy nie pozwala na wzrost bakterii pozytywnych Grama i dużej liczby bakterii znalezionych w jamie pokarmowej.

Dlatego służy go do kultywowania bakterii Gram -ujemnych, które powodują gorączkę dur brzuszną, Salmonella Typhi, W próbkach kału.

Środki różnicowe

Ten typ wykorzystuje pewną cechę diagnostyczną dla organizmu zainteresowania (na przykład osobliwości w jego metabolizmie), aby móc je zidentyfikować z innym gatunkiem, który rośnie w tym samym medium.

Może ci służyć: transfazy: co to jest, funkcje, nomenklatura, podklasy

Zarówno media różnicowe, jak i środki selektywne są bardzo przydatne w dziedzinie mikrobiologii klinicznej i zdrowia publicznego, ponieważ dyscypliny te muszą wykryć obecność określonych mikroorganizmów związanych z patologią lub złymi warunkami higieny.

Możesz dodać substancje wskaźnikowe w uprawie, które dają charakterystyczną funkcję poszukiwanej kolonii. Na przykład do średniego agar-eozyny-rul metylenu (skrócone EMB) i agar-MacConkey są dodawane laktozę i wskaźnik pH.

Tak więc, gdy kolonia rozwija się w tych mediach z zdolnością do fermentacji laktozy i wytwarzania aldehydów, można je zaobserwować w specjalnym kolorze.

Kroki przygotowania mediów kultutycznych

Obecnie uprawy można kupić w sposób liofilizowany. Dlatego przygotowanie jest ułatwione i pozostaje tylko produkt.

Treść musi być ciężka (biorąc pod uwagę ostateczną kwotę, którą chcesz przygotować) i rozpuszczona w wodzie destylowanej po wszystkich wskazaniach produktu.

Zawartość płynnych mediów należy podzielić na pożądane pojemniki (płytki Petriego, rurki itp.) W celu późniejszej sterylizacji.

Aby rozpowszechnić solidne medium, konieczne jest stopienie go za pomocą mikrofalowej lub przesłania materiału do kąpieli wodnej. Średnie pH należy dostosować.

Zwykle agar jest stosowany w rurkach testowych lub w płytkach Petriego. Jeśli agar zestala się w położeniu nachylonej, z odpowiednim kątem dla końcowej krawędzi zaciskowej, jest znany jako flet lub nachylone rurki pico.

Kiedy agar zestala się w całkowicie pionowej pozycji, otrzymuje nazwę „głębokiego”.

Po sterylizacji mediów - za pomocą autoklawu - pozwalają im ostygnąć. Muszą one manipulować w środowisku wolnym od mikroorganizmów, najczęstsze jest praca z lżejszym zapłonem, które zapewnia aseptyczne środowisko w jego pobliżu.

Bibliografia

1. Celis, J. I. (2006). Biologia komórkowa: podręcznik laboratoryjny (Tom. 2). Elsevier.
2. Finegold, s. M., Bailey, w. R., Baron, e. J., Fineglod, s. M., & Scott i. G. (1991). Bailey Scott: diagnoza mikrobiologiczna. Pan -american Medical.
3. Olivas, e. (2004). Podręcznik mikrobiologii oraz II i praktyki parasytologii. Autonomiczny University of Ciudad Juarez.
4. Schlegel, godz. G., & Zaborosch, c. (1993). Mikrobiologia generała. Cambridge University Press.
5. Tortora, g. J., Funke, ur. R., & Case, c. L. (2007). Wprowadzenie do mikrobiologii. Wyd. Pan -american Medical.