Bulion selenito What Is, Foundation, przygotowanie, używa

On Bulion selenito Jest to selektywne podłoże hodowli płynnej. Został zaprojektowany przez Leifsona w celu wzbogacenia próbek, w których podejrzewa się obecność bakterii enteropatogennych z rodzaju Salmonella.

Media te spełniają wymagania American Public Health Association (APHA), a zatem są akceptowane do badania obecności Salmonelli w próbkach stolca, moczu, płynnej lub stałej żywności, wodzie, między innymi.

Bulion selenito. Źródło: Zdjęcie wykonane przez autora MSC. Marielsa Gil

Skład chemiczny, który sprzyja odzyskaniu tych mikroorganizmów, a z kolei hamuje wzrost innych. Jest to głównie toksyczne dla większości bakterii należących do rodziny Enterobacteriae. Pozwala jednak również na odzysk szczepów Shigella i nie hamuje wzrostu pseudomonów i proteus.

Składa się z bezwodnej seleny wodoru sodu, bezwodnego fosforanu sodu, peptonów i laktozy. Istnieje również wariant, do którego dodaje się Cistina, stąd jej nazwa bulionu Selenito-Cistina.

Obecnie preferowane jest użycie bulionu selenito-cistinowego, ponieważ uzyskuje się wyższy odsetek odzyskiwania salmonelli równoważny z innymi selektywnymi środkami o tym samym celu, takich jak bulion tetrationan sodu.

Podstawa

Peptones zawarte w bulionie służą jako składniki odżywcze do dobrego rozwoju mikroorganizmów. Szczepy Salmonella wykorzystują peptones jako źródło azotu, witamin i aminokwasów.

Laktoza jest fermentowalnym węglowodanem, podczas gdy selenit sodu jest substancją inhibitora, która spowalnia wzrost bakterii Grama dodatnich i większość bakterii obecnych w florze jelitowej, zwłaszcza rodzinie Enterobacteriae. Fosforan sodu to amortyzator, który stabilizuje średnie pH.

Może ci służyć: chemiostean: Charakterystyka, historia i zastosowania

W przypadku wariantu bulionu Selenito, który zawiera L-cistinę, ten dodatkowy związek jest środkiem redukującym, który minimalizuje toksyczność selenitu, zwiększając odzyskiwanie salmonelli.

Przygotowanie

-Bulion selenito

Jeśli masz elementy mieszanki, możesz ważyć:

4 GR bezwodnego wodoru sodu.

10 GR bezwodnego fosforanu sodu.

5 GR peptonów.

4 GR laktozy.

Rozpuść związki w 1 litorze sterylnej wody destylowanej. Można go lekko podgrzewać, aby rozpuścić w całości.

Niektóre laboratoria narażają pożywkę przez 10 minut w pary Fleente, aby go sterylizować, ponieważ nie należy stosować autoklawów. Jeśli medium jest sterylizowane, można go przechowywać w lodówce.

Można go również przygotować bez sterylizacji i serwowania 10 do 15 ml do sterylnych rur testowych.

W takim przypadku powinieneś odstać i użyć natychmiast. Ponieważ medium nie jest sterylne, nie można go przechowywać w lodówce do późniejszego użycia.

-Przygotowanie mediów komercyjnych

Jeśli dostępny jest medium komercyjne, 23 grają odwodnioną pożywkę i rozpuszczone w litrowi sterylnej wody destylowanej. Krótko ciepło, aby zakończyć rozpuszczenie. Nie sterylizuj w autoklawie. Aseptycznie serwuj 10 lub 15 ml w sterylnych rurach testowych.

Ostateczne pH pożywki musi wynosić 7,0 ± 0,2.

Należy zauważyć, że kolor odwodnionego pożywki jest beżowy, a przygotowanie jest jasne i półprzezroczyste bursztyn.

Wariant bulionu selenito-cistin

Zawiera te same związki bulionu selenitowego, ale dodaje się 10 mg torystyny. Reszta procedury jest dokładnie taka sama, jak opisano powyżej.

Może ci służyć: grupa parafiletyczna

Aplikacje

Ta pożywka jest specjalna do zastosowania w badaniach epidemiologicznych, w przypadkach, w których choroba nie jest w jej ostrym etapie, bezobjawowych pacjentów lub zdrowych nosicieli.

Izolacja płci Salmonella jest zwykle trudna, ponieważ zwykle zanieczyszczają próbki w krótkim czasie. Bycie w orzechu.

Z drugiej strony surowiec, z którym często przygotowywane są przetworzone pokarmy, są narażone między innymi na ciepło, procesy odwodnienia, stosowanie środków dezynfekujących, promieniowania i konserwantów.

Dlatego Salmonellas obecne w surowcu są źle traktowane przez przedłożenie produktu do wyżej wymienionych procesów przemysłowych. Podobnie, w przypadku próbek klinicznych, takich jak kał, szczepy mogą być słabe, jeśli pochodzą od pacjentów leczonych antybiotykami.

Dlatego podejrzewa się, że każda próbka o obecności Salmonelli musi być wstępnie wzbogacona w bulionie Laktosado, a następnie wzbogacona w bulion selenito, aby zoptymalizować jego odzysk w pożywkach selektywnych, takich jak SS agar, Xilosa Agar, de -klaska lizyna (XLD) , Hoktoen Entereric (on) i Green Apar -Brillante,.

Posiany

W przypadku próbek kału weź 1 GR próbki i zawiesić w rurce z 10 do 15 ml bulionu selenito. Jeśli odchody są płynne, weź 1 ml i zawieść w bulionie. W przypadku wymazów odbytniczych pobierz materiał wymazu w bulionie.

W stałych próbkach pokarmowych wymaga 1 G i zawieszenie w bulionie Selenito.

W płynnych produktach spożywczych mieszaj w równych częściach z bulionem selenitu podwójnego stężenia.

Może ci służyć: hallucigenia

W przypadku próbek moczu musisz odśrodić, odrzucić supernatant, wziąć cały osad i zawiesić go w bulionie selenito.

Buliony w 37 ° C są inkubowane przez 24 godziny inkubacji. Wzrost bakteryjny świadczy zmętnienie. Można również uwzględnić dodatkową rurkę na próbkę, aby inkubować 42 ° C. Następnie zasij selektywne solidne nośniki z bulionu Selenito.

QA

W celu kontroli sterylności 37 ° C inkubuje się przez 24 godziny na bulionie selenito z każdej działki. Oczekuje się, że nie ma zmętnienia, żadna średnia zmiana koloru.

Aby kontrolować właściwe funkcjonowanie medium, można zastosować znane szczepy, takie jak:

Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Salmonella Typhimurium ATCC 14028,  Salmonella choleraessuis ATCC 12011, Escherichia coli ATCC 25922 i Proteus mirabilis ATCC 43071.

Oczekiwane wyniki to:

• Dla pierwszych trzech szczepów bakteryjnych wzrost musi być zadowalający.
• Dla Escherichia coli Częściowe zahamowanie.
• Dla proteus umiarkowanego wzrostu.

Ograniczenia

Bulion pół -selenito jest toksyczny dla ludzkiej skóry, dlatego należy unikać bezpośredniego kontaktu.

Bibliografia

1. Britania Laboratories. Bulion selenito. Dostępne na: Britanialab.com
2. Neogen Laboratories. Bulion selenito. Dostępne na: Foodsafety.Neogen.com