Jasnozielony agar, fundament, przygotowanie, użycia

On Jasnozielony agar Jest to solidne medium hodowlane o wysokim stopniu selektywności. Jest używany wyłącznie do izolacji szczepów z rodzaju Salmonella; Istnieją jednak pewne wyjątki, takie jak gatunki tajfi i parathia, które nie rosną w tym medium.

Poszukiwanie gatunku Salmonella jest częste w próbkach stołka, wody lub żywności. W tym sensie to medium może być bardzo przydatne. Ten agar został utworzony w 1925 roku przez Kristensen, Lester i Jurgens, został później zmodyfikowany przez Kauffmann.

Składa się z multiplayonów z trawionej tkanki zwierzęcej kazeiny, zawiera również ekstrakt drożdżowy, chlorek sodu, laktozę, sacharozę, czerwony fenolowy, jasnozielony i chwyt.

Charakteryzuje się, że jest dość niegościnnym pożywką dla większości bakterii, sprzyjając wzrostowi Salmonelli, jednak niektóre coli są w stanie utrzymać się w niej, rozwijając się słabo.

Ważne jest, aby podkreślić, że na tym medium gatunek Shigella nie rośnie i żaden z nich Salmonella Typhimurium, żaden Salmonella paratyphi. Dlatego jeśli chcesz odizolować te mikroorganizmy, należy użyć innych mediów, takich jak agar XLD, między innymi.

Podstawa

Jasnozielony agar

Każdy z elementów, które składają się na medium, spełnia określoną funkcję, która określa cechy i właściwości agaru.

Pluripepttons i drożdżowe ekstrakt są źródłem składników odżywczych, w których mikroorganizmy przyjmują azot i minerały niezbędne do ich rozwoju. Laktoza i sacharoza są źródłami energii dla mikroorganizmów, które są zdolne do ich fermentacji.

Jasnozielona jest substancją inhibitora, która zapobiega rozwojowi bakterii dodatnich Grama i dużej liczby mikroorganizmów ujemnych Grama.

Może ci służyć: troponina: charakterystyka, struktura, funkcje i testy

Chlorek sodu zapewnia stabilność osmotyczną dla środowiska. Podczas gdy czerwony fenol jest wskaźnikiem pH, ten sam kolor vira podczas wykrywania produkcji kwasów z fermentacji węglowodanów.

Kolonie nieferyczne laktozy i sacharozy rosną w tym medium białego lub przezroczystego białego koloru, na czerwonym tle. Na przykład bakterie z rodzaju Salmonella.

Podczas gdy bakterie fermentacyjne laktozy lub sacharozy zdolne do rosnące w tym medium, rozwijają żółtawy lub żółtawy żółty kolor, na zielonkawym żółtym tle. Na przykład, Escherichia coli i klebsiella pneumoniae.

Jasnozielone warianty agarowe (BGA)

Istnieją inne warianty jasnozielonego agaru; Jasnozielona zielona girvobiocin Apar (NBG) i genialna chciwość wyhodowały laktozę Awcyny Glicerolu (NBGL).

Jasnozielona glukoza agarowa novobiocin (NBG)

Zawiera rolnictwo soi sojowe, żelazo amonowe Citro.

Służy do izolowania kolonii Salmonella z próbek stolca.

W tym przypadku jasnozielona i nowobiocyna są substancjami hamującymi, które zapobiegają wzrostowi bakterii dodatnich Grama i niektórych mikroorganizmów ujemnych Grama.

Tiosiarczan sodu jest źródłem siarki, a cytrynian żelazowy jest źródłem żelaza, oba niezbędne do ujawnienia wytwarzania siarkowodoru poprzez tworzenie czarnego osadu siarczku żelazowego.

Glukoza jest fermentowalnym węglowodanem, a fenolowo -czerwony jest wskaźnikiem pH.

W tym medium kolonie Salmonelli rozwijają się duże z czarnym centrum otoczonym czerwonawą halo, a następnie wyraźnym widocznym obszarem. Niektóre szczepy Citrobacter freundii wytwarzaj identyczne kolonie z koloniami Salmonella.

Może ci służyć: flora i fauna Durango: reprezentatywne gatunki

Genialna Gleren Green Green Avobiocin Laktoza Glicerol (NBGL)

Ta pożywka zawiera rolnictwo soi sojowe, cytrynian żelazowy amonu, tiosiarczan sodu, laktoza, glicerolu, jasnozielona, ​​nowobiocyna i woda destylowana.

Różnica w tym medium z poprzednim.

Pożywka służy również do izolacji gatunków salmonelli, kolonie rozwijają się czarne, przez wytwarzanie siarkowodoru.

Tylko kolonie, które nie wytwarzają kwasu z glicerolu lub laktozy, osiągają h₂Jest wystarczające, ponieważ pH pod wpływem tworzenia h₂S. Powoduje to bezbarwne kolonie dla większości gatunków Proteus i Cytrobacter.

Przygotowanie

-Waż 58 gramów odwodnionej pożywki uzyskanej na rynku. Dodaj go w litości zniszczonej wody. Wymieszaj, odstaw na kilka minut i prześlij przygotowanie do źródła ciepła, aż całkowicie się rozpuści.

-Autoklaw w 121 ° C przez 15 minut, nie przekraczają czasu sterylizacji.

-Odstaw i podawaj nadal na sterylne płytki Petriego. Ostateczne pH musi wynosić 6,9 ± 0,2.

-Upowszechnij i zapisz w lodówce do użycia. Przed siewem talerzy muszą przyjąć temperaturę pokojową.

-Proszek jest zielony i przygotowany ma pomarańczowo-brązowy lub czerwonawy zielonkawy kolor, w zależności od pH i domu komercyjnego. Bardzo brązowy kolor wskazuje, że agar został przegrzany.

-Gdy agar nie jest zalecany, nie zaleca się ponownego budowy, ponieważ medium się pogarsza.

Używa/aplikacje

Ta pożywka jest używana do poszukiwania szczepów z rodzaju Salmonella próbek kału i produktów mlecznych, między innymi.

Może ci służyć: fosfatydilseryna: struktura, synteza, funkcje, lokalizacja

Będąc dość niegościnnym środkiem, wskazane jest, aby zasnąć obfity inokulum, jeśli zastosowana jest próbka bezpośrednia. W przeciwnym razie wstępne wzbogacanie i wzbogacenie próbek należy wykonać przed siewem w tym medium.

Ponieważ niektóre szczepy Salmonella są hamowane lub rosną z trudem, wskazane jest, aby towarzyszyć temu pożywce z innymi selektywnymi wiekami Salmonella.

Każda kolonia z typową cechą salmonelli musi być poddana testom biochemicznym w celu ostatecznej identyfikacji.

QA

Aby przetestować właściwe funkcjonowanie jasnozielonego agaru. Szczepy ATCC można użyć do obserwowania ich rozwoju na nim.

Najczęstsze szczepy stosowane do kontroli jakości to: Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Salmonella Typhimurium ATCC 14028, Proteus mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Escherichia coli ATCC 25922,  Shigella Flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538.

Pierwsze 3 muszą dać różowe lub przezroczyste białe kolonie na czerwonym tle. Salmonella z dobrym rozwojem i proteusem z ograniczonym lub regularnym wzrostem.

W przypadku Klebsiella i Escherichia oczekuje się zielonkawego żółtego kolonie z żółtym tłem, aw przypadku Shigella i Staphylococcus należy je zahamować.

Odwodniona pożywka musi być przechowywana w temperaturze pokojowej, w suchym miejscu, ponieważ pożywka jest bardzo higroskopijna.

Bibliografia

1. Britania Laboratory. Jasnozielony agar. 
2. Laboratorium BD. BD genialny zielony agar.