Pożywny agar

Pożywny agar
Pocieranie bakteryjne z E. Pożywne agar coli. Źródło: Martin Priestley, CC BY-SA 4.0, Wikimedia Commons

Co to jest pożywny agar?

On pożywny agar Jest to nieselektywne i niefferencyjne pożywkę do hodowli stałej. W tym środowisku wszelkiego rodzaju bakterie niezniszczające rosną z odżywczego punktu widzenia.

Jest to prosty sposób i pomimo nazwy zawiera niższe odżywianie.

Jego przydatność w laboratorium jest bardzo zróżnicowana. Głównie służy do subkusji gatunków, utrzymania szczepów, liczenia kolonii, jako podstawa do przygotowywania krwi, między innymi.

Ponadto, ze względu na jego lekki kolor, produkcję pigmentów wytwarzanych przez niektóre szczepy bakteryjne, takie jak zielonkawy pigment Pseudomonas aeruginosa, Ceglany czerwony pigment wytwarzany przez Serratia Marcescens W temperaturze pokojowej złoty żółty pigment Staphylococcus aureus, pośród innych.

Ponadto jest to jedna z najbardziej ekonomicznych mediów kulturowych na rynku.

Podstawa

Jak wspomniano powyżej, jest to bardzo prosty sposób oparty na dostarczaniu substancji żywieniowych do wzrostu bakteryjnego bez ograniczeń i bez złożonych reakcji do interpretacji.

Ponieważ medium jest półprzezroczyste, idealnie jest liczyć kolonie za pomocą metody posadzonej głębokości.

Kompozycja

Składa się głównie z ekstraktu mięsa lub drożdży, peptonas lub żelatyny trzustki, agaru, chlorku sodu i wody destylowanej.

Ekstrakt mięsa lub drożdży i peptonów reprezentuje źródła węgla i niezbędnych minerałów (azot, fosfor i siarka), które będą wykorzystywane przez bakterie jako źródło czynników energii i wzrostu.

Podobnie agar -agar jest podstawą wszystkich stałych pożywek hodowlanych, zastępującej żelatynę, która była pierwszym związkiem podstawowym używanym przez Roberta Kocha w celu zapewnienia solidnej spójności mediów.

Może ci służyć: flora i fauna wysp Falkland: wybitne gatunki

Agar jest polisacharydem złożonym z galaktozy, galaktomanu, agarozy i agarectin. Cumage w 40 ° C i stopi się blisko 100 ° C.

Ze swojej strony chlorek sodu zapewnia środowisko niezbędne do rozwoju bakterii.

Wreszcie woda służy do nawadniania i rozpuszczania liofilizowanych związków. Należy zastosować wodę destylowaną do neutralnego pH. Obecna woda nie należy stosować, ponieważ zawiera wapń i magnez, które mogą reagować z fosforanami środowiska i tworzyć nierozpuszczalne sole.

Przygotowanie

W przypadku litra pożywnego agaru musisz ważyć 31 grać odwodnionego pożywki. Jest umieszczony w fixoli i rozpuszcza się w litrom wody destylowanej. Po 5 minutach odpoczynku rozgrzej na źródle ciepła i wymieszaj stale, aż zagotuje się przez 1 lub 2 minuty.

Następnie fixola jest umieszczana w autoklawie i sterylizuje w 121 ° C przez 20 minut. Kulminowany czas, jest usuwany z autoklawu i jest podawany w sterylnych Petriego.

Jeśli płytki Petriego są jednorazowe (plastik), pożywka musi być rozmieszczona, gdy agar ma przybliżoną temperaturę 50 ° C, aby zapobiec odkształceniu nadmiernego ciepła.

Upowodzenie i zapisz na odwróconym uchwycie i w lodówce w lodówce w 2-8 ° C do czasu użycia.

Płytki muszą zostać złagodzone przed sadzeniem. Pożywne płytki agarowe nie należy stosować, jeśli są zanieczyszczone lub odwodnione.

Przygotowane średnie pH należy dostosować do 7,3 ± 0,2.

Aplikacje

Jest to najprostsze pożywkę hodowlaną stosowaną w laboratorium mikrobiologii. Jego preparat jest doskonały do ​​wzrostu bakterii niezarejestrowanych.

Jego główne zastosowania są następujące:

  • Jako podstawa przygotowania agaru krwi: Czasami jest stosowany jako podstawa do przygotowywania krwi, jednak nie jest to najczęściej używana podstawa.
  • Stymulować sporulowanie bakterii kształtujących zarodniki: Szczególnie przydatne jest stymulowanie sporulacji bakterii kształtujących zarodniki, takich jak Bacillus sp. W tym celu zasiana jest szczep gatunku Bakcyl i inkubuje przez 24 godziny w 37 ° C w aerobiozie. Po wyhodowaniu kolonii płyta jest poddawana naprężeniu temperaturowym, to znaczy temperatura pieca w 44 ° C jest zwiększona i pozostawiona przez 24 godziny więcej lub wprowadzana do lodówki przez 24 godziny. Pod koniec czasu są one rozszerzone z upraw i barwienie barwieniem gramem lub barwieniem zarodników Shaeffer-Fulton. Będą obserwować Bacilli z endosporami (zarodniki wewnątrz Bacillus) i egzospor (zarodniki z Bacillus).
  • Przekształcenia konserwacji: Niektóre laboratoria badawcze lub wsparcia wydziału wymagają żywych bakterii o znaczeniu klinicznym tak długo, jak to możliwe, w celu zastosowania Banku Bakterii (Bakteriecka) do pracy badawczej lub przygotowania praktyk nauczania, w których uczniowie nauczą się ich manipulować i identyfikować je i identyfikować je Mikroorganizmy. W tym celu można użyć pożywnego agaru, a także wlewu serca mózgu. Agar jest przygotowywany, wlewa się do rur z pokrywką baquelitu i pochylając się na podstawie, tak że agar zestala się tworzenie taco na dnie i ramkę na powierzchni (szczyt fletu). Każda rurka jest oznaczona przez umieszczenie nazwy bakterii, które zostaną zasiane i datę. Każda z bakterii będzie wysiewana na ramce i będzie inkubowana przez 24 godziny, gdy kolonie będą rosły. Rury są przechowywane w temperaturze pokojowej. Bakterie należy przedłużyć od 1 do 3 miesięcy, aby uniknąć zanieczyszczenia i odwodnienia środowiska, a także śmierci bakterii. W ten sposób można utrzymać tylko bakterie nieokreślone.
  • Kolonie: Chociaż istnieją wyspecjalizowane środki dla liczby kolonii, takie jak hrabia standardowa, w tym celu można użyć pożywnego agar. Dlatego jest to bardzo przydatne w analizie mikrobiologicznej żywności i wody.
  • Wykonanie testów diagnostycznych: Ponieważ jest to środek, który nie zawiera krwi, ani żadnego innego dodatku, jest idealny do przyjmowania kolonii uprawianych w tym medium do wykonania testu katalazy. Ponadto, ze względu na swój jasny kolor, jest wskazane do wykonania testów oksydazy bezpośrednio na obszarze zasięka zasięgu, bez zakłóceń.
  • Rekreacyjne mezofilowe odzyskiwanie aerobowe (plaże): Agar składników odżywczych przygotowany z 10% wody morskiej jest przydatny do oceny mezofilnych tlenków w wodach plażowych. W ten sposób można zobaczyć poziom prawdziwego zanieczyszczenia, jaki mają wody z tymi mikroorganizmami, ponieważ w tego typu próbkach wyniki nakładają. Można to wyjaśnić ze względu na nagłe zmianę cierpiących przez bakterie podczas przechodzenia z nadwczesnego środowiska do środowiska o niskiej soli, dlatego mikroorganizmy wchodzą w stan letargu, w którym są one opłacalne, ale nie uprawne.
Może ci służyć: samozapłanianie

Bibliografia

  1. Forbes, ur., Sahm, d., Weissfeld, a. Diagnoza mikrobiologiczna Bailey & Scott. Pan -american Editorial S.DO.
  2. Koneman, e., Allen, s., Janda, w., Schreckenberger, s. 1., Winn, w. Diagnoza mikrobiologiczna. Pan -american Editorial S.DO.