Biggy Agar, przygotowanie i zastosowania

On Biggy Agar Jest to solidne, selektywne i różnicowe media kultury. Został zaprojektowany do izolowania i pomocy w identyfikacji głównego gatunku Candida. Jego imię Biggy pochodzi od akronimu w angielskiej glicynie glukozy Bismuth Yeas.

Oryginalna formuła została stworzona przez Nickersona, więc to medium jest również znane jako Nickerson Agar. Obecnie składa się z ekstraktu drożdżowego, glicyny, dekstrozy, cytrynianu amonu, cytrynianu bizmutowego, siarczanu sodu i agaru.

Graficzna reprezentacja wielkiego agaru. Źródło: Flickr.com

Biggy Agar jest sformułowany do różnicowania złożonych gatunków C. Albicans, c. Tropicalis, c. Krusei i c. Kefyr, Ale inne gatunki, takie jak Candida glabrata, c. Parapsilosis, c. Guilliermondii, Trichhosporun SP, Geotrichum candidum i Saccharomyces cerevisiae.

Ma jednak dobrą wrażliwość i swoistość, porównując ją z innymi mediami z podobną funkcją, jest to na drugim miejscu, pokonane przez Chromagar. Z tego powodu wiele laboratoriów woli te ostatnie, chociaż jest to znacznie droższe.

Powinno być jasne, że użycie biggy agar, a także innych podobnych środków, pomaga szybkiej przypuszczalnej identyfikacji, ale nigdy nie potwierdzają. Dlatego muszą być dostępne dodatkowe metody identyfikacji; Na przykład systemy identyfikacyjne VITEK 32 i API 20.

[TOC]

Podstawa

Biggy Agar jest uważany za częściowo selektywny pożytek do izolacji drożdży, zwłaszcza z rodzaju Candida, chociaż inne gatunki mogą rosnąć.

Jest to również medium zróżnicowane, ponieważ w zależności od zaangażowanego gatunku, różne cechy będą obserwowane w aspekcie, kolorze, kształcie i rozmiarze. Jest uważany za medium chromogenne dla rozwoju różnych kolorów w koloniach.

Może ci służyć: METIONINE: Charakterystyka, funkcje, jedzenie, korzyści

Kolor przedstawiony przez kolonie drożdży wynika z obecności bizmutowego sulfitu w agarze. Nickerson zdał sobie sprawę, że drożdże z rodzaju Candid. To pochodzi kolonie między światłem do czarnej.

Ten agar zawiera ekstrakt drożdży i dekstrozy, który stanowi źródło podstawowych składników odżywczych i energii do rozwoju drożdży. Glicyna jest stymulującym wzrost drożdży, jednocześnie hamując rozwój niektórych bakterii.

W tym samym znaczeniu cytrynian amonu i bizmut. Agar jest agentem, który nadaje solidną spójność środowiska.

Przygotowanie

Ważyć 45 gr z odwodnionej hodowli i rozpuszcza się w litrom wody destylowanej. Wstrząśnij i podgrzej mieszaninę, pozwalając gotować przez 1 minutę do kompletnego roztworu. Ta pożywka hodowlana nie jest sterylizowana w autoklawie.

Podczas chłodzenia około 45 ° C w Maria wlej 20 ml na petriego sterylne płytki.

Kolor odwodnionego pożywki jest żółtawy i przygotowany szary to żółtawy biały żel, w którym można zaobserwować niewielki osad flokulantowy.

PH musi wynosić 6,8 ± 0,2.

Przygotowane medium musi być przechowywane w lodówce (4 ° C) i chronić przed światłem. Jak jest to sposób, który nie jest samowystarczalny, należy użyć tak szybko, jak to możliwe. Jego stosowanie jest zalecane, zanim spotka się 3 dni od jego przygotowania.

Może ci służyć: biomateriały

Używać

Płytki inkubuje się w temperaturze pokojowej (25 ° C) o 24, 48 i 72 godziny, czas inkubacji można wydłużyć do 5 dni.

Każdy gatunek Candida rozwija pewne cechy, które sprawiają, że odróżniają się od siebie. Średniej producenci opisują następujące cechy dla każdego gatunku:

-Candida albicans kompleks: Rozwija się w tym agaru jako gładkie, okrągłe, brązowe lub czarne kolonie, z lekką krawędzią grzybni. Z zastrzeżeniem, że ciemny kolor nie jest rozpowszechniony na środowisko.

-Candida tropicalis: Jasne, małe, ciemne jasne kolonie, z czarną i jasną krawędzią grzybni. Ciemny kolor rozprzestrzenia się w kierunku środowiska, charakterystyczny dla tego gatunku, po inkubacji przez 72 godziny.

-Candida Krusei Rozwijaj szorstkie, płaskie kolonie, z krawędzią między brązowym a Negruzco.

-Candida parakrusei: Średnie kolonie, przez większość czasu z szorstkim wyglądem, płasko. Kolor może się różnić między jasną ciemnoczerwistą kawą do jasnej czerwonawej kawy. Krawędź kolonii ma obszerną, żółtawą grzybnię.

-Candida Stellatoid: Rozwijaj średnie, płaskie kolonie, ciemnobrązowy, prawie czarny. Rozwój grzybni jest bardzo rzadki.

Badanie przeprowadzone przez Yücesoy i Marol w 2003 r. Wykazało, że pożywka chromagarowa ma lepszą wrażliwość i swoistość dla różnicowania i identyfikacji różnych gatunków Candida niż Wielki Agar.

QA

W przypadku kontroli sterylności płyty inkubowane są bez zaszczepienia w temperaturze 25 ° C, w ciemności przez 24 do 48 godzin, oczekuje się, że nie ma żadnej zmiany lub zmiany koloru.

Może ci służyć: sens dotyku: części, jak to działa i funkcjonuje

Zalecane szczepy ATCC w celu wykonywania kontroli jakości są:

Kompleks Candida albicans  ATCC 60193, Candida glabrata ATCC 2001, Candida Krusei ATCC 34135. We wszystkich z nich oczekuje się wzrostu, jak opisano powyżej.

Możesz także użyć następujących szczepów:

Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 i Staphylococcus epidermidis ATCC 12228. W pierwszych dwóch oczekuje się całkowitego hamowania, ale w przypadku częściowego wzrostu kolonii będzie kolor kremowy.

W przypadku S. aureus Oczekuje się, że będzie całkowicie zahamowany, ale jeśli rosną częściowo, ich kolonie są białe.

Ograniczenia

Niektóre bakterie są w stanie rozwijać się na tym medium, a nawet mogą stać się ciemne, symulując sąsiada Candida.

Tabela: Charakterystyka kolonii niektórych drożdży w Biggy uzgodniona zgodnie z pracą Yücesoy M i Marol S.

Źródło: Yücesoy M, Marol S. Wydajność Chromagar Candida i Biggy Agar w celu identyfikacji gatunków Yas. Ann Clin Antimicrob Microbiol. 2003; 2 (8): 1-7

Bibliografia

1. Yücesoy M, Marol S. Wydajność Chromagar Candida i Biggy Agar w celu identyfikacji gatunków Yas. Ann Clin Antimicrob Microbiol. 2003; 2 (8): 1-7.
2. MCD Lab. Biggy Aging Plik techniczny. Dostępne na: McDlab.internet/
3. Lab Neogen. Biggy Agar. Dostępne na: Foodsafety.Neogen.com
4. CDADA PREMADISA LABOROTIONS. Biggy Agar. Dostępne na: Condalab.com
5. BD Laboratories. BD Biggy Agar (Bismuth glukozowa glicyna Yaest Agar). 2011. Dostępne na: BD.com