Baird Parker Agar What Is, Foundation, przygotowanie, użycie

On Baird Parker Agar lub agar żółtkowy jaja jest solidnym, selektywnym i różnicowym pożywką hodowlaną. Został utworzony w 1962 r. W przypadku wykrywania i liczby pozytywnych gronkowców koagulazy (Staphylococcus aureus).

Składa się z hydrolizowanej trzustki kazeiny, ekstraktu mięsnego, ekstraktu drożdżowego, chlorku litu, glicyny, pirogronianu sodu, telurytu potasu, chwytu i żółtka jaja.

Typowe kolonie Staphylococcus aureus w Baird Parker Aging. Źródło: Daizy John [CC przez 4.0 (https: // creativeCommons.Org/licencje/według/4.0)]

Baird Parker Agar opiera się na pojemności S. aureus w celu zmniejszenia telurito i wyprodukowania lecytinazy. Obie właściwości generują kolonię o specyficznych cechach dla tego gatunku. Dlatego zapewnia dużą skuteczność w wykrywaniu tego mikroorganizmu.

Typowe kolonie S. aureus Są czarne lub ciemnoszare, z otaczającymi je krawędzią bezbarwną i czystą halo, odróżniając się od reszty mikroorganizmów. Ten patogen można znaleźć w próbkach klinicznych, wodach, kosmetykach i surowych lub gotowanych potrawach.

Jego diagnoza lub wykrywanie ma ogromne znaczenie ze względu na różnorodność wytwarzanych przez niego patologii, takich jak zatrucie pokarmowe, zespół oparzenia skóry, zespół wstrząsu toksycznego, ropnia, zapalenie opon mózgowych, posocznica, zapalenie wsierdzia, między innymi.

Podstawa

Moc żywieniowa

Hydrolizowany trzustka kazeina, ekstrakt mięsny i ekstrakt drożdży są źródłami składników odżywczych, witamin i minerałów niezbędnych do ogólnego rozwoju mikrobiologicznego, podczas gdy pirogronian i glicyna są związkami sprzyjającymi specyficznym wzrostowi dla wzrostu Staphylococcus aureus.

Selektywny

Agar Baird Parker jest selektywny, ponieważ zawiera substancje, które hamują wzrost towarzyszącej flory, przy jednoczesnym rozwoju S. aureus. Związki hamujące to chlorek litowy i telluryt potasu.

Mechanizm różnicowy

To medium umożliwia różnicowanie S. aureus reszty ujemnej koagulazy gronkowca. S. aureus Ma zdolność do zmniejszenia telurytu do czarnego metalicznego teluro, tworząc czarne lub ciemnoszare kolonie.

Podobnie żółtko jaj zapewnia substraty do wykazania obecności lektinazy i enzymu Lipasa. S. aureus Jest to dodatnia lecytinaza, dlatego wokół kolonii będzie obserwowana przez kolonię, co wskazuje, że lecytyna była hydrolizowana.

Może ci służyć: oddychanie skrzela: jak to się robi i przykłady

W tym sensie pojawienie się w tej czarnej lub jasnej czarnej lub szarej okrężnicy S. aureus. 

Jeśli powstaje strefa opadów, wskazuje, że występuje aktywność lipazy. Niektóre szczepy S. aureus Są pozytywne i inne negatywne lipazy.

W przypadku S. aureus Być pozytywną lipazą, a wokół czarnej lub ciemnoszarej kolonii będzie obserwowany nieprzezroczysty obszar.

Kolonie bakterii inne niż S. aureus zdolne do rozwoju w tym medium, będą rozwijać bezbarwne lub brązowe kolonie, bez halo wokół.

Możesz także obserwować nietypowe czarne kolonie z lub bez bezbarwnej krawędzi, ale bez lekkiej halo. Te kolonie nie powinny być brane pod uwagę, nie odpowiadają S. aureus.

Przygotowanie

Emulsja żółtka jaja

Zabrane jest chłodne jajko kurczaka, dobrze wędrowało i umieszczało od 2 do 3 godzin w 70% alkoholu. Następnie jajo otwiera się aseptycznie i ostrożnie oddziela jasność żółtka. Następnie przyjmuje się 50 ml żółtka i mieszane z 50 ml sterylnego roztworu fizjologicznego.

1% P/V Potasu Tellt

Niektóre domy komercyjne sprzedają 1% poetesasium teluro gotowe do użycia. Jest dodawany do medium, zanim środki się zestalają.

Aby przygotować to rozwiązanie w laboratorium, 1.0 GR z tellurytu potasu i rozpuszcza się w części wody. Następnie ilość wody jest zakończona, aż osiągnie 100 ml. Roztwór musi być sterylizowany metodą filtracji.

Przygotowanie medium hodowlanego

Zważyć 60 grać odwodnioną pożywkę i rozpuść się w 940 ml wody destylowanej. Pozostaw mieszaninę spoczynkową na około 10 do 10 minut.

Może ci służyć: relacje międzygatunkowe: typy i przykłady

Stosuj często mieszając ciepło, aby poprawić proces rozpuszczania. Gotuj przez minutę. Sterylion w autoklawie w 121 ° C przez 15 minut.

Odstaw, aż osiągnie temperaturę 45 ° C i dodaj 50 ml emulsji żółtka jaja i 10 ml 1% telurytu. Dobrze wymieszaj i podawaj od 15 do 20 ml na sterylnych płytkach Petriego.

Pozwól, aby zestalić, zamówić w odwróconych płytarach i oszczędzaj w lodówce do czasu użycia.

Ostateczne pH przygotowanej pożywki musi wynosić 6,8 ± 0,2.

Przed siewem próbki powinieneś poczekać, aż płyta przyjmie temperaturę środowiska. Zachaj płytki z powodu wysadzenia lub powierzchni posadzonej szpatułką Drigalski.

Kolor odwodnionego pożywki jest pieczony, a kolor przygotowanego pożywki to lekki bursztyn.

Używać

Próbki kliniczne

Próbki kliniczne są zasiane bezpośrednio przez rozładowanie części materiału na jednym końcu płyty, a stamtąd wyróżniały się z powodu wyczerpania. Inkubuj przez 24 do 48 godzin w 35-37 ° C.

Próbki pokarmu

Ważą 10 GR próbki żywności i homogenizacja w 90 ml 0,1%wody Peptonada, stamtąd w razie potrzeby przygotowują rozcieńczenia. Zaszczepić tabliczki trzykrotnie 0,3 ml przygotowanych roztworów i zasila się po powierzchni za pomocą szpatułki Drigalski. Jest to incuba przez 24 do 48 godzin w 35-37 ° C.

Ta metodologia pozwala policzyć uzyskane typowe kolonie i jest idealna, gdy obecność S. aureus powyżej 10 UFC na próbkę GR/ml.

Jeśli podejrzewa się, że ilość S. aureus Jest mały lub jest dużo towarzyszących flory, sugeruje się. To będzie sprzyjało wzrostowi S. aureus i hamować rozwój towarzyszącej flory. Rurki Tuft zostaną wysiewane w Agar Baird Parker.

Może ci służyć: w jaki sposób żywe organizmy z naszego środowiska wyróżniają się?

Próbki wody

W próżniowym i sterylizowanym systemie filtracji filtracyjnej 100 ml badanej wody jest filtrowane, a następnie membranę mikroporowatą 0,4 mikronów usuwa się za pomocą sterylnego zacisku i umieszcza na płytce Baird Parker. Jest to incuba przez 24 do 48 godzin w 35-37 ° C. Ta technika pozwala na liczenie typowych kolonii S. aureus.

QA

Aby ocenić jakość agaru Baird Parker, można zastosować znane szczepy, takie jak Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 o Proteus mirabilis ATCC 43071.

W przypadku odmian S. aureus ATCC jest znane z tego, że zmniejsza teluryty i są to dodatnie lipazy i lecytynazy. Dlatego musi istnieć zadowalający rozwój i rosnąć wypukłe kolonie o czarnym środku i bezbarwnej krawędzi, z nieprzezroczystą aureolą i kolejnym zewnętrznym halo przezroczystym.

Ze swojej strony S. naskórka W tym medium oczekuje się słabego rozwoju, a szare kolonie są cumowe do czarnej, bez wyraźnej halo.

Dla I. coli I P. Mirabilis Oczekuje się, że będzie całkowicie lub częściowo zahamowany. W przypadku uprawy brązowych kolonii bez nieprzezroczystej strefy lub czystej halo.

Zalecenia

-Pożywki nie należy podgrzewać po dodaniu telurito i żółtka jaja.

-Przygotowanie emulsji żółtka jaja i jej agregatu w środku jest bardzo wrażliwym krokiem zanieczyszczenia. Należy zachować ostrożność.

-Jeśli istnieje obecność typowych kolonii S. aureus Należy go potwierdzić przez jazdę testem koagulazy do wspomnianego odkształcenia.

-Jeśli istnieją wątpliwe wyniki z koagulazą, należy zamontować inne testy potwierdzające.

-Uważaj, aby nie mylić obecności typowych kolonii S. aureus Z atypowymi czarnymi kolonami.

Bibliografia

1. BD Laboratories. Baird Parker Agar. Dostępne na: BD.com
2. Laboratories Francisco Soria Melguizo. Baird Parker Agar. Dostępne na: http: // f-soria.To jest/informuje