Cled Agar

Corynebacterium stratum na agarze Cled. Źródło: Nathan Reading From Halesowen, Wielka Brytania, CC.0, Wikimedia Commons

Jaki jest kleny agar?

On Cled Agar (Cistine-laktoza-elektrolity) jest różnicowym środkami hodowli stałej, stosowanymi do diagnozy infekcji dróg moczowych. Skład pożywki hodowlanej jest przeznaczony do dobrego rozwoju patogenów moczowych i jest idealny do kwantyfikacji jednostek formowania okrężnicy (UFC).

Medium hodowlane CLED nie jest niezbędne, ponieważ mogą rosnąć w nim mikroorganizmy Gram -ujemne i Gram. Ale to nie stanowi problem, ponieważ większość infekcji moczowych jest spowodowana pojedynczym typem mikroorganizmu.

W przypadku infekcji polimikrobialnych można osiągnąć 2 lub 3 różne bakterie, ale jest to bardzo rzadkie, a przez większość czasu są to zanieczyszczone próbki.

Wśród bakterii Gram -ujemnych, które mogą rosnąć w tym pożywce, należą Bacilli należące do rodziny Enterobacteriaceae i innych bachilli jelitowych, będąc najczęściej izolowanym uroopatogenami w próbkach moczu: Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Morganella Morganii, Pseudomonas aeruginosa, pośród innych.

Również wśród bakterii pozytywnych Grama, które mogą rosnąć w tym medium Staphylococcus aureus, Staphylococcus saprofitic, Enterococcus faecalis, Streptococcus agalactiae, Chorynebacterium SP, Lactobacillus sp SP I mogą nawet uprawiać drożdże, takie jak złożone Candida albicans.

Jednak ze względu na skład chemiczny środowiska nie pozwala na rozwój niektórych wymagających patogenów z tytułu geniturinarnych, takich jak Neisseria gonorrhoeae, Gardnerella Pochwinis, pośród innych.

Foundation of the Cled Agar

Cled Hodowlę ma jako źródło ekstraktu energetycznego mięsa, hydrolizowanej kazeiny i hydrolizowanej żelatyny hydrolizy. Zapewniają składniki odżywcze do rozwoju małych wymagających bakterii.

Zawiera również cystynę, aminokwas, który pozwala na wzrost coli, rozróżniającym jej niewielkim rozmiarze.

Może ci służyć: czynniki wirulencji

Zawiera również jako fermentowalne laktozę węglowodanową, więc to media jest zróżnicowane, będąc w stanie rozróżnić bakterie fermentacyjne nieferyzowania laktozy.

Fermentacyjne bakterie obracają pożywkę pH przez produkcję kwasu, rozwijając żółte kolonie, podczas gdy bakterie nietopecyjne nie generują zmian w pożywce, dlatego przyjmują zabarwienie oryginalnego agaru, zielony kolor.

Reakcja fermentacji ujawnia się dzięki obecności wskaźnika pH, który w tym pożywce jest niebieski bromotimol.

Z drugiej strony niskie stężenie ośrodkowych elektrolitów hamuje typowy wzrost inwazyjny rodzaju rodzaju Odmieniec, Nazywany efektem roju. Generuje to przewagę w odniesieniu do innych mediów, ponieważ pozwala na zliczenie UFC, w tym jeśli płeć jest obecna Odmieniec.

Jednak niskie stężenie elektrolitów hamuje wzrost niektórych gatunków z rodzaju Shigella, To jest wada w odniesieniu do innych mediów.

Foundation of the Cled Agar (Bevis)

Istnieje wariant lub modyfikacja tego medium, wykonanego przez Bevis, który włączył oryginalny skład kwasu fuksyny (Andrade). To samo działa wraz z błękitem bromotimolowym, aby odróżnić bakterie fermentacyjne od nieferyzacji.

Różnica między środowiskiem konwencjonalnym i zmodyfikowanym jest kolor, który przyjmują kolonie. W przypadku bakterii fermentujących laktozę kolonie nabierają czerwonawego pomarańczowego koloru z różową lub czerwoną aureolą, podczas gdy nieferyczne są szarością.

Aplikacje

Zastosowany jest agar cled wyłącznie W przypadku próbek moczu próbki. Korzystanie z tego medium jest szczególnie częste w europejskich laboratoriach, podczas gdy w Ameryce jest mniej używane.

Może ci służyć: amensalizm: charakterystyka, przykłady, różnice z jadą Dinerism

Zbiór próbki musi spełniać pewne parametry, aby uzyskać wiarygodne wyniki, w tym:

Nie przyjmowanie antybiotyków przed przyjmowaniem próbki.

Najlepiej weź mocz pierwszej godziny poranka, ponieważ jest on bardziej skoncentrowany, gdy nie jest możliwe pobranie próbki metodami inwazyjnymi.

Umyj genitalia na długo przed przyjęciem próbki.

Odrzuć pierwszy strumień oddawania moczu, a następnie umieść pojemnik.

Zbierz od 25 do 30 ml moczu w dobrze oznaczonym sterylnym pojemniku.

Natychmiast weź laboratorium otoczone na lodzie.

Musi zostać przetworzony przed 2 godzinami wydania lub lodówki w temperaturze 4 ° C przez maksymalnie 24 godziny.

Próbki moczu

Próbka moczu musi zostać rozcieńczona 1:50.

W celu rozcieńczenia, Colloqar 0,5 ml moczu pacjenta i rozcieńczają 24,5 ml sterylnego roztworu fizjologicznego. Zmierz 0,1 ml rozcieńczonego moczu i zasila się po powierzchni za pomocą szpatułki Drigalski na Cled Medium.

Jest to wskazana metoda zasiana do liczenia kolonii. Dlatego jest stosowany w próbkach moczu, ponieważ wyniki muszą być wyrażone w UFC/ML.

W przypadku kwantyfikacji uzyskanych kolonii postępuj w następujący sposób: Policz kolonie płyty i pomnóż przez 10, a następnie przez 50. To jest ilość UFC/ml moczu.

Interpretacja

Podmioty powyżej 100.000 UFC/ml -indica infekcja moczowa.

Napotykanie poniżej 1000 UFC/ml- nie ma infekcji.

Między 1000-10.000 UFC/ml -dudoso, możliwe zanieczyszczenie, powtórz próbkę.

ID

Gram powinien zostać przekazany do kolonii uprawianych w Cled.

Może ci służyć: katalaza: charakterystyka, struktura, funkcje, patologie

Na przykład, jeśli jest to Bacillus ujemny Gram, będzie on zasieony na agaru MacConkey, gdzie fermentacja lub nie laktoza jest potwierdzona. Ponadto do wykonania testu oksydazy dołączany jest pożywny agar.

W przypadku, gdy Gram ujawnia kokosy dodatkowe Grama, może podlegać słonemu agarowi mannitolowi i pożywnym agarowi. W ostatnim teście katalazy przeprowadzono. Wreszcie, jeśli zostaną zaobserwowane drożdże, zostaną wysiewane na agarze Sabouraud.

Wiele laboratoriów ignoruje stosowanie pożywki i woli tylko używać krwi, MacConkey i pożywnego agaru do siedzenia próbek moczu.

Przygotowanie

W feloli z litrami wody destylowanej rozpuść 36,2 grać kleonego agarza proszkowego. Po 5 minutach odpoczynku podgrzej ponownie zawieszony agar, ciągle mieszając, aż zagotuje się przez 1 minutę.

Następnie sterylizuj w 121 ° C przez 15 minut w autoklawie. Zakończony czas, wycofaj się z autoklawu i pozostaw ostygnięcie, aż osiągnie temperaturę 45 ° C. Następnie podaje się go między 15-20 ml na każdym sterylnym Petriego.

Procedura obsługiwana przez płytki należy przeprowadzić w laminarnym dzwonku przepływowym lub przed zapalniczką Bunsena, aby uniknąć zanieczyszczenia.

Podawane płytki mogą się zestalić, zamówić w formie odwróconej i przechowywane w lodówce (2-8 ° C).

Ostateczne pH przygotowanej pożywki musi wynosić 7,3 ± 0,2.

Bibliografia

1. Zalecenia dotyczące diagnozy mikrobiologicznej infekcji moczowej. Chil. Infectol. Odzyskano z Scielo.org.
2. W połowie kleje. Odzyskane z Britanialab.com.